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从生食鱼肉中提取GII型诺如病毒的不同方法的比较
引用本文:范一灵,杨美成,杨燕. 从生食鱼肉中提取GII型诺如病毒的不同方法的比较[J]. 中国食品卫生杂志, 2016, 28(6): 753-758
作者姓名:范一灵  杨美成  杨燕
作者单位:上海市食品药品检验所,上海 201203,上海市食品药品检验所,上海 201203,上海市食品药品检验所,上海 201203
摘    要:目的本研究比较了多种可能适用于生食水产鱼肉中诺如病毒(No V)的提取方法。方法人工污染GII型No V三文鱼肉样品,通过病毒洗脱、浓缩、核酸提取,以及实时荧光定量反转录-聚合酶链式反应(RT-q PCR)检测等步骤的比较和优化,提高样品中No V的检测成功率和回收率。结果采用Tri/Glycine/Beef extract缓冲溶液洗脱、PEG/Na Cl溶液沉降、增加氯仿-正丁醇(1∶1,V/V)溶液萃取等步骤,可以有效富集样品中的No V,并有效去除样品中的PCR抑制成分。优化后的检测方案可以将人工污染GII型No V的鱼肉样品的回收率由不足3%提高至15.15%,检测灵敏度可以达到17.3 RT-PCRU/25 g。结论优化后的病毒提取方法具有良好的耐用性和重现性,适合于生食水产鱼肉中No V的快速检测。

关 键 词:诺如病毒   提取   鱼肉   生食   水产品   实时荧光定量反转录PCR   回收率   检测
收稿时间:2016-08-11

Comparison of different methods for extracting GII norovirus from raw fish
FAN Yi-ling,YANG Mei-cheng and YANG Yan. Comparison of different methods for extracting GII norovirus from raw fish[J]. Chinese Journal of Food Hygiene, 2016, 28(6): 753-758
Authors:FAN Yi-ling  YANG Mei-cheng  YANG Yan
Affiliation:Shanghai Institute for Food and Drug Control,Shanghai 201203,China,Shanghai Institute for Food and Drug Control,Shanghai 201203,China and Shanghai Institute for Food and Drug Control,Shanghai 201203,China
Abstract:
Keywords:
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