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猪瘟病毒E2(gp55)基因在昆虫细胞中的表达
引用本文:季新成,陈杰,张彦明,吴发兴,黄宝续,李晓成,张燕霞,许信刚.猪瘟病毒E2(gp55)基因在昆虫细胞中的表达[J].中国预防兽医学报,2004,26(4):256-258.
作者姓名:季新成  陈杰  张彦明  吴发兴  黄宝续  李晓成  张燕霞  许信刚
作者单位:1. 西北农林科技大学,动物科技学院,陕西,杨凌,712100;农业部动物检疫所,国家动物流行病学研究中心,山东,青岛,266032
2. 农业部动物检疫所,国家动物流行病学研究中心,山东,青岛,266032
3. 西北农林科技大学,动物科技学院,陕西,杨凌,712100
基金项目:陕西省科技攻关项目,陕西省重点实验室基金,国家流行病学专题项目
摘    要:将除去3'端跨膜区的猪瘟病毒E2基因亚克隆到杆状病毒转移载体pFastBacHTb,获得重组质粒pFBHT-E2,转化进含穿梭载体Bacmid的感受态细胞DH10Bac,发生转座作用,经抗性及蓝白斑筛选得到含E2基因的重组载体质粒rBacmid-E2,以脂质体介导的方法将此重组载体质粒转染sf9昆虫细胞,获得重组病毒,命名为rvBac-E2.经SDS-PAGE和Western-blot及ELISA等方法检测,结果表明,此E2基因在昆虫细胞中正确表达,表达的蛋白能与猪瘟阳性血清发生特异性反应.

关 键 词:猪瘟病毒  E2基因  杆状病毒表达载体  表达
文章编号:1008-0589(2004)04-0256-03
修稿时间:2003年10月29

Expression of E2 gene of classical swine fever virus in insect cell
JI Xin-cheng.Expression of E2 gene of classical swine fever virus in insect cell[J].Chinese Journal of Preventive Veterinary Medicine,2004,26(4):256-258.
Authors:JI Xin-cheng
Affiliation:JI Xin-cheng~
Abstract:The E_2 gene of Classical Swine Fever Virus(CSFV)was subcloned into baculovirus transfer vector and recombinant baculovirus vector pFBHT-E_2 was extracted.Then it was transferred into E.coli DH10Bac and recombinant bacmid was constructed.The recombinant baculovirus was obtained after the tranferation of the recombinant bacmid into sf_9 cell,named as rvBac-E_2.The techniques of SDS-PAGE,Westernblot and ELISA were used to detect and identify the products expressed in sf_9 cell by recombinant baculovirus.The results indicated the E_2 gene was properly expressed in sf_9 cell,and the expressed protein could be recognized by the positive serum of CSFV.
Keywords:CSFV  E_2 gene  baculovirus expression vector system  expression
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