LSM14A蛋白通过活化IRF3抑制乙型肝炎病毒的复制 |
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引用本文: | 黄冰玉,杨爱清,李建英,周钢桥.LSM14A蛋白通过活化IRF3抑制乙型肝炎病毒的复制[J].军事医学,2021,45(8):572-577,584. |
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作者姓名: | 黄冰玉 杨爱清 李建英 周钢桥 |
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作者单位: | 南华大学,湖南衡阳421001;军事科学院军事医学研究院辐射医学研究所,蛋白质组学国家重点实验室,国家蛋白质科学中心(北京),北京100850;军事科学院军事医学研究院辐射医学研究所,蛋白质组学国家重点实验室,国家蛋白质科学中心(北京),北京100850;第九六四医院第二门诊部,长春130062 |
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摘 要: | 目的 探讨RNA相关蛋白LSM家族成员14A(LSM14A)在乙型肝炎病毒(HBV)感染中的功能及其潜在的分子机制.方法 通过慢病毒包装方法构建稳定敲低LSM14A的HepG2.2.15细胞株和稳定过表达LSM14A的HepG2.2.15细胞株,利用CRISPR/Cas9技术构建LSM14A敲除的HepG2.2.15细胞.采用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)和蛋白免疫印迹(Western印迹)检测敲低、过表达和敲除效果.利用RT-qPCR和Northern印迹杂交检测HBV RNA的表达水平;RT-qPCR检测HBV DNA的表达水平;酶联免疫吸附实验(ELISA)检测乙肝病毒表面抗原(HBsAg)和乙肝病毒e抗原(HBeAg)的表达水平.利用Western印迹检测下游分子,RT-qPCR检测干扰素的分泌.结果 在HepG2.2.15细胞中过表达LSMJ 4A可显著抑制HBV的复制,而敲低或敲除LSM14A可显著促进HBV的复制.过表达LSM14A后,p-TBK1、p-IRF3、Ⅰ型和Ⅱ型干扰素的表达水平均显著增加.结论 在HepG2.2.15细胞中LSM14A蛋白通过促进IRF3的磷酸化诱导Ⅰ型和Ⅱ型干扰素的表达,进而抑制HBV的复制.
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关 键 词: | 乙型肝炎病毒 病毒复制 聚合酶链反应 酶联免疫吸附测定 RNA相关蛋白LSM家庭成员14A 天然免疫 p-IRF3 |
LSM14A reduces hepatitis B virus replication by activating IRF3 pathway |
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Authors: | HUANG Bing-yu YANG Ai-qing LI Jian-ying ZHOU Gang-qiao |
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Abstract: | |
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