|
|||||
|
|
| 癌胚抗原启动子调控的白细胞介素-2/干扰素β融合基因的原核及真核表达质粒的构建 | |
| 引用本文： | 王艳,李岩,崔刚,封清川,李小东,李丰,LI Hong-jie.癌胚抗原启动子调控的白细胞介素-2/干扰素β融合基因的原核及真核表达质粒的构建[J].中华消化杂志,2006,26(6):399-403. |
| 作者姓名： | 王艳 李岩 崔刚 封清川 李小东 李丰 LI Hong-jie |
| 作者单位： | 1. 110004,沈阳,中国医科大学第二医院消化内科 2. 中国医科大学细胞生物学实验室 3. Genetics of Development and Disease Branch,NIH/NIDDK,USA |
| 基金项目： | 辽宁省教育厅基金资助项目（2004D186） |
| 摘 要： | 目的 根据细胞因子间协同作用特点,构建人白细胞介素-2（IL-2）与干扰素（IFN）β的融合基因,并用癌胚抗原（CEA）基因启动子调控其在结肠癌细胞株中的靶向表达.方法 分别用原核及真核表达载体,检测融合蛋白的表达情况.PCR、RT-PCR法扩增得到CEA启动子、IL-2 cDNA、IFNβ cDNA,应用原核表达质粒pGEX-5X-1、真核表达质粒pcDNA3.1/HisA、绿色荧光蛋白质粒pEGFP-C1,构建出原核表达质粒和真核表达质粒;SDS-PAGE电泳检测原核表达;用脂质体法将真核表达质粒转入结直肠癌细胞株Lovo（CEA高表达）、HT-29（CEA低表达）和对照Hela细胞（CEA阴性）,转染后分别以流式细胞仪、荧光显微镜、Western印迹等方法检测肿瘤细胞凋亡情况及蛋白表达情况.结果融合基因可在大肠杆菌及肿瘤细胞内表达融合蛋白;对肿瘤细胞有明显的杀伤作用;由CEA启动子调控的融合基因在Lovo细胞的表达高于HT-29细胞,在CEA阴性的Hela细胞中几乎不表达.结论 CEA启动子可靶向性调控融合基因在肿瘤细胞的表达,具有协同作用的细胞因子融合蛋白可能有更强的抗肿瘤作用. |
| 关 键 词： | 癌胚抗原 启动子 细胞因子 基因治疗 融合基因 |
| 收稿时间： | 2005-09-19 |
| 修稿时间： | 2005年9月19日 |
Construction of eukaryotic and prokaryotic expression vectors of interlukin-2/interferon β fusion gene regulated by carcinoembryonic antigen promotor |
|
| LI Hong-jie.Construction of eukaryotic and prokaryotic expression vectors of interlukin-2/interferon β fusion gene regulated by carcinoembryonic antigen promotor[J].Chinese Journal of Digestion,2006,26(6):399-403. | |
| Authors: | LI Hong-jie |
| Abstract: | |
| Keywords: | Carcinoembryonic antigen Promoter Cyto kine Gene therapy Fusion gene |
| 本文献已被 CNKI 维普 万方数据 等数据库收录！ | |
