细胞培养实验中条件培养基相关问题探讨

目的“通过LX-2人肝星状细胞条件培养基（CM）对HepG2人肝癌细胞增殖活性的影响，探讨CM各影响因素在离体实验中的作用。方法：收集LX-2细胞第24小时、48小时、72小时条件培养基，设100％、50％、25％共3个浓度，并设1％DMEM组为对照，培养24小时、48小时、72小时；并将收集的第24小时条件培养基分装分别保存至4℃1周、-20℃1周、-80℃3个月、-20℃3个月，采用MTT法检测各组条件培养基对HepG2细胞增殖活性的影响。结果：①收集时间：第24小时、第48小时LX-2CM具有明显的促增殖作用（P〈0．01）；培养24小时后，各收集时间点的LX-2CM的促增殖作用为：第24小时〉第48小时〉第72小时（P〈0．01）；培养48小时后，第48小时〉第72小时（P〈0．01）。②添加浓度：培养24小时后，第24小时CM100％浓度、第24小时CM50％浓度、第24小时CM25％浓度、第48小时CM100％浓度均有明显的促增殖作用（P〈0．01）；第24小时CM各浓度比较，100％优于50％（P〈0．05）；第48小时CM各浓度，100％优于50％（P〈0．05）、25％（P〈0．01）。③多元线性回归分析，条件培养基收集时间与HepG2细胞增殖呈负相关，浓度与其呈正相关。④保存条件：-20℃1周CM优于-80℃3个月CM、-20℃3个月CM（P〈0．01）；-800C3个月CM优于-20℃3个月CM（P〈0．01）。结论：LX-2CM对HepG2细胞具有明显的促进增殖活性作用，其作用随着收集时间点延长、浓度减小，增殖效果逐渐降低；CM的保存条件对其作用效果有影响。

Study on the conditioned medium in vitro experiments

Objective:To observe the effect of conditioned medium(CM) of LX-2 human-derived hepatic stellate cell on proliferation in HepG2 cells,to explore the roles of conditioned medium with different factors in vitro experiment.Methods:The conditioned medium of LX-2 were collected after 24,48 and 72hs,and divided into three groups in three concentration levels,which were 100%,50%,25%,1%DMEM as the control group.The conditioned medium of LX-2 collected after 24hs were divided into 4 groups according to preservation ...