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小鼠endostatin基因的克隆、表达及表达产物的活性鉴定
引用本文:屈延,章翔,吴景文,柴玉波,吴元明,高大宽. 小鼠endostatin基因的克隆、表达及表达产物的活性鉴定[J]. 医学争鸣, 2000, 21(4): 456-459
作者姓名:屈延  章翔  吴景文  柴玉波  吴元明  高大宽
作者单位:第四军医大学全军神经外科研究所,陕西,西安,710033
基金项目:国家自然科学基金资助项目!(39970854)
摘    要:目的 克隆并表达小鼠endostatin基因,并初步检测其血管生长抑制功能,为胶质瘤的基因治疗探索新的途径。方法 从小鼠肝组织用RT-PCR法扩增endostatin基因,重组人pUC19质粒,经测序证实无误后,重组人表达载体pDH,经温度诱导表达,并用鸡胚绒毛尿囊膜(CAM)实验检测表达产物活性。结果 从小鼠肝组织中成功扩增到endo-statin基因,测序与报道序列一致,重组进pDH后经温度诱导表达,在SDS-PAGE电泳上得到一条新的蛋白表达带。分子质量为20ku,纯化后的蛋白能明显抑制CAM的血管生长。结论 成功构建了小鼠endostatincDNA的重组克隆pDH-Endo,并在大肠杆菌中获得高效表达。在CAM实验中表明纯化后的蛋白具有明显血管抑制作用。为利用endostatin进行脑胶质瘤等实验 全瘤的基因治疗奠定了实验基础。

关 键 词:内皮抑素 反转录-聚合酶链式反应 基因克隆 基因表达 鸡胚绒毛尿囊膜实验 endostatin基因
修稿时间::

Cloning and expression of mouse endostatin gene and identification of its biolog ical activity
QU Yan,ZHANG Xiang,WU Jing-Wen,CHAI Yu-Bo,WU Yuan-Ming,GAO Da-Kuan. Cloning and expression of mouse endostatin gene and identification of its biolog ical activity[J]. Negative, 2000, 21(4): 456-459
Authors:QU Yan  ZHANG Xiang  WU Jing-Wen  CHAI Yu-Bo  WU Yuan-Ming  GAO Da-Kuan
Abstract:
Keywords:endostatin  RT -PCR  gene amplification  cloning  chick embryo  chorioallantoic membrane assay (CAM)
本文献已被 CNKI 维普 万方数据 等数据库收录!
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