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人突触小体相关蛋白25单克隆抗体的制备及初步鉴定
引用本文:孙志杰,许永亮,刘凌志,付楚溪,熊向华,毕秀丽,张惟材. 人突触小体相关蛋白25单克隆抗体的制备及初步鉴定[J]. 生物技术通讯, 2019, 0(3): 343-347
作者姓名:孙志杰  许永亮  刘凌志  付楚溪  熊向华  毕秀丽  张惟材
作者单位:辽宁大学生命科学院;军事医学研究院生物工程研究所;沈阳药科大学生命科学与生物制药学院;沈阳师范大学
摘    要:目的:制备抗人突触小体相关蛋白25(SNAP25)的鼠源单克隆抗体。方法:利用大肠杆菌表达SNAP25蛋白,纯化后免疫BALB/c小鼠制备杂交瘤细胞,筛选针对SNAP25的阳性杂交瘤细胞株,鉴定抗体亚型;用杂交瘤细胞株制备腹水单抗,纯化后利用SDS-PAGE检测抗体纯度。结果:表达并纯化得到纯度大于90%的SNAP25蛋白,免疫小鼠后经2轮筛选得到12株阳性杂交瘤细胞株,其中抗体重链包括IgG1、IgG2型,轻链大部分为κ链;选择具有相对较高抗原结合活性的14号杂交瘤细胞株制备腹水,纯化后得到纯度大于90%的抗体。结论:获得1株高纯度的针对SNAP25的鼠源单克隆抗体,为肉毒毒素的检测奠定了基础。

关 键 词:人突触小体相关蛋白25  肉毒毒素  单克隆抗体

Prepareation and Identification of Monoclonal Antibodies Against Synaptosomal Associated Protein 25
SUN Zhi-Jie,XU Yong-Liang,LIU Ling-Zhi,FU Chu-Xi,XIONG Xiang-Hua,BI Xiu-Li,ZHANG Wei-Cai. Prepareation and Identification of Monoclonal Antibodies Against Synaptosomal Associated Protein 25[J]. Letters in Biotechnology, 2019, 0(3): 343-347
Authors:SUN Zhi-Jie  XU Yong-Liang  LIU Ling-Zhi  FU Chu-Xi  XIONG Xiang-Hua  BI Xiu-Li  ZHANG Wei-Cai
Affiliation:(Academy of Science, Liaoning University, Shenyang 110036;Beijing Institute of Biotechnology, Bejing 100071;Shenyang Pharmaceutical University, Shenyang 110016;Shenyang Normal University, Shenyang 110034, China)
Abstract:SUN Zhi-Jie;XU Yong-Liang;LIU Ling-Zhi;FU Chu-Xi;XIONG Xiang-Hua;BI Xiu-Li;ZHANG Wei-Cai(Academy of Science, Liaoning University, Shenyang 110036;Beijing Institute of Biotechnology, Bejing 100071;Shenyang Pharmaceutical University, Shenyang 110016;Shenyang Normal University, Shenyang 110034, China)
Keywords:synaptosomal associated protein 25(SNAP25)  botulinum neurotoxin  monoclonal antibody
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