| 人白细胞介素18(hIL-18)的纯化及生物学活性的鉴定 |
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| 引用本文： | 杨广民,方艳秋,谭岩,刘力华. 人白细胞介素18(hIL-18)的纯化及生物学活性的鉴定[J]. 中国免疫学杂志, 2004, 20(12): 850-854 |
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| 作者姓名： | 杨广民 方艳秋 谭岩 刘力华 |
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| 作者单位： | 1. 吉林省人民医院中心实验室,长春,130021
2. 吉林大学第一医院中心实验室,长春,130021 |
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| 基金项目： | 卫生部临床学科重点科研项目 (2 0 0 13 14 5 )，吉林省科技厅重点科研项目 (2 0 0 2 0 40 3 )，长春市科委科研项目 (0 4 0 2GG2 18)，2 0 0 1年吉林大学医疗新技术新疗法,2 0 0 2年吉林大学创新基金 |
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| 摘 要： | 目的：在大肠杆菌中高效表达重组人IL-18(rhIL-18)蛋白，制备具有高纯度、高活性的rhIL-18。方法：用IFTG诱导重组蛋白表达载体pKK223-3／hIL-18进行蛋白表达；菌体经超声破碎分离包含体，并对包含体进行洗涤、变性和复性处理，用DEAE-Sepharose CL-6B阴离子交换柱纯化复性的rhIL-18；以人外周血单核淋巴细胞，通过T细胞增殖实验、^125I-UdR标记的细胞毒实验、ELISA方法检测细胞因子的产生量等方法，测定rhIL-18的生物学活性。结果：在大肠杆菌中成功地诱导、表达了rhIL-18，SDS-PAGE凝胶电泳分离显示在分子量大约18．3kD处有一诱导蛋白带，Western blot证明表达产物与抗IL-18单克隆抗体有特异性免疫反应；表达产物经纯化后纯度达94％；表达的rhIL-18蛋白具有促进T细胞增殖、增强NK细胞细胞毒作用及诱导外周血单核淋巴细胞合成IFN-γ的能力，基本上具有天然IL-18相同的生物学活性。结论：为rhIL-18的获得及为进一步研究其生物学功能提供了一定的条件，并为将rhIL-18用于肿瘤的免疫生物治疗奠定了基础。
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| 关 键 词： | 重组人白细胞介素18 凝胶过滤 T细胞 NK细胞 细胞因子 |
| 文章编号： | 1000-484X(2004)12-0850-05 |
Purification and biological identification for the recombinant human interleukin 18 |
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| YANG Guang Min.Central Laboratory,Hospital of Jilin Province,Changchun ,China FANG Yan Qiu,TAN Yan,LIU Li Hua.Central Laboratory,the First Clinical College,Jilin Univesity,Changchun ,China[. Purification and biological identification for the recombinant human interleukin 18[J]. Chinese Journal of Immunology, 2004, 20(12): 850-854 |
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| Authors: | YANG Guang Min.Central Laboratory Hospital of Jilin Province Changchun China FANG Yan Qiu TAN Yan LIU Li Hua.Central Laboratory the First Clinical College Jilin Univesity Changchun China[ |
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| Affiliation: | YANG Guang Min.Central Laboratory,Hospital of Jilin Province,Changchun 130021,China FANG Yan Qiu,TAN Yan,LIU Li Hua.Central Laboratory,the First Clinical College,Jilin Univesity,Changchun 130021,China[ |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | rhIL 18 Gel filtration T cells NK cytotoxicity Cytokine |
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