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沙眼衣原体质粒蛋白pORF5原核表达及免疫原性鉴定
引用本文:李忠玉,汪世平,吴移谋,朱翠明,何卓.沙眼衣原体质粒蛋白pORF5原核表达及免疫原性鉴定[J].中国现代医学杂志,2009,19(4).
作者姓名:李忠玉  汪世平  吴移谋  朱翠明  何卓
作者单位:1. 南华大学,微生物学与免疫学教研室,湖南,衡阳,421001
2. 中南大学湘雅医学院,湖南,长沙,410078
摘    要:目的 构建沙眼衣原体(CT)pORF5蛋白基因重组质粒pGEX-6p/pORF5,表达并纯化质粒蛋白pORF5,并鉴定其免疫原性.方法 用PCR法扩增pORF5基因,定向插入pGEX-6p原核表达载体构建原核表达重组体pGEX-6p/pORF5,重组体经酶切、PCR及测序鉴定后,经IPTG诱导在大肠杆菌中表达pORF5融合蛋白.融合蛋白纯化后免疫BALB/c鼠,ELISA及Western-blot分析pORF5质粒蛋白免疫原性及免疫反应性.结果 PCR扩增出795 bp基因片段,序列测定证实重组质粒插入片段与GenBank登陆的D型Ct一致;pORF5融合蛋白在大肠杆菌中获得高效表达;ELISA检测免疫小鼠的血清效价为1:25 600.结论 pORF5蛋白在原核细胞中可有效表达并具有较好的免疫原性,为进一步研究该蛋白的结构功能、阐明Ct的致病机制、研制基因工程疫苗提供了有利的条件.

关 键 词:沙眼衣原体  pORF5基因  免疫原性  原核表达

Expression and immunogenicity of the pORF5 plasmid protein from Chlamydia trachomatis
LI Zhongyu , WANG Shiping , WU Yimou , ZHU Cuiming , HE Zhuo.Expression and immunogenicity of the pORF5 plasmid protein from Chlamydia trachomatis[J].China Journal of Modern Medicine,2009,19(4).
Authors:LI Zhongyu  WANG Shiping  WU Yimou  ZHU Cuiming  HE Zhuo
Abstract:
Keywords:
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