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肾癌G250基因和hGM-CSF基因双顺反子表达质粒的构建及鉴定
引用本文:李科,李君武,苏泽轩,刘艳. 肾癌G250基因和hGM-CSF基因双顺反子表达质粒的构建及鉴定[J]. 中国现代医学杂志, 2009, 19(8)
作者姓名:李科  李君武  苏泽轩  刘艳
作者单位:1. 暨南大学附属第一医院,泌尿外科,广东,广州,510630
2. 暨南大学医学院微生物与免疫教研室,广东,广州,510632
基金项目:广东省医学重点专科基金
摘    要:目的 应用分子生物学技术,构建pIG250-GM双顺反子真核表达质粒并进行测序鉴定.方法 从肾癌组织中提取总KNA,采用RT PCR技术扩增肾癌G250抗原的基因编码区序列,同时从质粒pORF-hGM-CSF中扩增出基因佐荆hGM-CSF,分别克隆到真核表达载体pIRES的多克隆位点A(MCSA)和B(MCSB)中,构建pIG250-GM真核表达质粒,并进行酶切鉴定.结果 酶切鉴定提示插入的基因片段大小分别为1.44kμ和0.47kμ,测序分析表明克隆的G250和hGM-CSF序列与GenBank上公布序列完全一致.结论 成功构建双顺反子表达pIGM-G250质粒,为研究G250-GMCSF基因负载的DC疫苗防治肾癌提供了必要的实验基础.

关 键 词:肾癌  G250  hGM-CSF  基因佐剂

Construction and identification of bicistronic eukaryotic expression plasmid containing G250 of renal carcinoma and hGM-CSF
LI Ke , LI Jun-wu , SU Ze-xuan , LIU Yan. Construction and identification of bicistronic eukaryotic expression plasmid containing G250 of renal carcinoma and hGM-CSF[J]. China Journal of Modern Medicine, 2009, 19(8)
Authors:LI Ke    LI Jun-wu    SU Ze-xuan    LIU Yan
Abstract:
Keywords:
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