半夏炮制过程中毒性凝集素蛋白的基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱分析

基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF MS)受灵敏度和重复性的影响，对完整蛋白的定量分析存在困难。本研究采用纤维素纳米晶体(CNC)辅助MALDI-TOF MS,结合内标法定量分析半夏炮制过程中半夏凝集素(PTL),通过优化CNC辅助样本制备的时长和比例，以麦胚凝集素(TVL)为内标，直接分析不同炮制程度半夏各炮制品及其浸泡上清液中PTL含量。结果表明，CNC辅助MALDI样本制备有效提升了MALDI-TOF MS定量分析的线性和重复性。随着炮制时间的延长，姜半夏、清半夏和法半夏炮制品的PTL含量逐渐下降，浸泡上清液中PTL含量逐渐上升。其中，由于pH值的改变，法半夏炮制品浸泡上清液中PTL含量呈先上升后下降的趋势。此外，将该方法应用于不同饮片生产企业的多批次半夏炮制品饮片中，均未检出PTL。该方法操作简便，可有效分析半夏炮制过程中PTL含量的变化，为研究半夏炮制过程对PTL的影响提供了参考。