猪FGL2基因cDNA末端序列检测及结构分析

检测猪FGL2基因cDNA末端序列并对该基因结构初步分析。α-32P dCTP放射性同位素标记cDNA探针筛选猪基因组DNA文库；cDNA末端快速扩增(rapid amplification of cDNA end,RACE)。以猪正常小肠及心脏组织提取新鲜总RNA，反转录后作为模板,设计基因特异性引物,采用Advantage 2 聚合酶混合物进行PCR扩增；依据猪与人FGL2基因3′端已知同源序列设计PCR上游引物，以人FGL2基因3′末端序列设计下游引物，以猪基因组DNA为模板采用Advantage 2 聚合酶混合物进行PCR反应；PCR载体重组质粒DNA亚克隆扩增。同位素探针未能筛选到特异阳性克隆，RACE反应检测到特异性转录起始位置及第一个转录终止位置，但仍未检测到第二个转录终止位置。猪基因组DNA行PCR扩增成功检测到猪FGL2基因3′末端未知序列及第二个转录终止位置。