| 癌胚抗原启动子调控融合自杀基因yCDglyTK载体的构建及其应用研究 |
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| 引用本文： | 刘霆,张桂英,陈玉祥,何青春,余术宜,徐美华,程军平,.癌胚抗原启动子调控融合自杀基因yCDglyTK载体的构建及其应用研究[J].中国医学工程,2006,14(2):120-124. |
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| 作者姓名： | 刘霆 张桂英 陈玉祥 何青春 余术宜 徐美华 程军平 |
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| 作者单位： | 1. 中南大学湘雅医院,消化内科,湖南,长沙,410008
2. 中南大学生物科学与技术学院,湖南,长沙,410013 |
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| 基金项目： | 中南大学校科研和校改项目 |
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| 摘 要： | 目的构建靶向性基因治疗载体pcDNA3．1（-）CryCDglyTK，研究癌胚抗原（CEA）启动子是否能控制新型融合自杀基因yCDglyTK在CEA阳性结肠癌细胞中专一性表达和杀伤作用。方法采用PCR、RT—PCR、融合PCR、酶切、连接等技术构建由CEA启动子、CMV增强子驱动的融合自杀基因pcDNA3．1（-）cvvCDglyTK表达载体和分别由CEA启动子和巨细胞病毒（CMV）增强子驱动的融合自杀基因pcDNA3．1（-）CEAyCDglyTK、pcDNA3．1（-）CMVyCDglyTK表达载体，以磷酸钙纳米为载体分别转染CEA阳性的人结肠癌细胞株LOVO细胞和CEA阴性的Hela细胞，采用RT—PCR、免疫荧光法检测感染细胞中yCDglyTK基因的表达，并用MIT法检测感染后细胞对5-氟胞嘧啶（5-FC）的敏感性。结果LOVO细胞在感染以上三种质粒表达载体后均有yCDglyTKmRNA表达，且对5-FC的敏感性明显增强，Hela细胞在纳米-pcDNA3．1（-）CMVyCDglyTK复合物感染后有yCDglyTKmRNA表达，对5-FC的敏感性增强，而在纳米-pcDNA3．1（-）CEAyCDglyTK及纳米-pcDNA3．1（-）CVyCDglyTK复合物感染后则没有yCDglyTKmRNA表达，5-FC对其亦无杀伤作用。结论该实验构建的由CEA启动子、CMV增强子驱动的融合自杀基因yCDglyTK靶向性基因治疗载体。能使融合自杀基因在CEA阳性细胞中专一性表达，从而达到靶向治疗肿瘤的目的。
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| 关 键 词： | 癌胚抗原 纳米载体 自杀基因 增强子 结肠癌 |
| 文章编号： | 1672-2019（2006）02-0120-05 |
| 收稿时间： | 2006-01-03 |
| 修稿时间： | 2006年1月3日 |
Construction of carcino-embryonic antigen promotor controls the novel fusion suicide gene yCDglyTK and its application |
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| LIU Ting,ZHANG Gui-ying,CHEN Yu-xiang,HE Qing-chun,YU Shu-yi,XU Mei-hua,CHENG Jun-ping.Construction of carcino-embryonic antigen promotor controls the novel fusion suicide gene yCDglyTK and its application[J].China Medical Engineering,2006,14(2):120-124. |
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| Authors: | LIU Ting ZHANG Gui-ying CHEN Yu-xiang HE Qing-chun YU Shu-yi XU Mei-hua CHENG Jun-ping |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | calcium phosphate nanoparticles suicide gene gene therapy |
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