hTERT片段真核表达质粒的构建

目的：构建人端粒酶逆转录酶(hTERT)片段的真核表达质粒，方法：从肿瘤组织中提取总RNA．采用RT—PCR法扩增hTERT基因并克隆人PGEM—T Easy载体中，然后再亚克隆于pcDNA3．1真核表达载体，用PCR扩增及限制性酶切法筛选重组真核表达质粒，并以DNA测序鉴定。结果：PCR扩增及限制性酶切法证实重组真核表达质粒的构建成功。测序表明，hTERT基因片段与GenBank公布的相应基因同源性比较，核苷酸序列的同源性为98．73％，氨基酸序列的同源性为99．68％。结论：成功构建了hTERT真核表达质粒，为进一步研究与hTERT相关的抗肿瘤免疫治疗奠定了基础。