逆萎康含药血清调控AKT/GSK-3β/β-catenin通路抑制MC细胞的上皮间质转化

目的：逆萎康（NWK）含药血清对MC细胞（MNNG诱导人胃黏膜上皮细胞系（GES-1）恶性转化）上皮间质转化（EMT）的影响及可能机制。方法：用不同浓度含药血清作用于MC细胞，采用蛋白免疫印迹法（Western blotting）检测E-cadherin、N-cadherin、vimentin、p-AKT Ser⁴⁷³、β-catenin、α-SMA、GSK-3β、p-GSK-3β Ser⁹、AKT蛋白的表达影响；采用实时荧光定量聚合酶链式反应（Real-time PCR）检测C-myc基因的表达影响。结果：与空白组比较，蛋白质印迹实验表明，逆萎康含药血清、AKT抑制剂GSK690693（10 μmol·L^-1）使得β-catenin、p-AKT Ser⁴⁷³、E-cadherin和p-GSK-3β Ser⁹在蛋白水平的表达下调（P<0.05），而α-SMA、N-cadherin和vimentin在蛋白水平上的表达上调（P<0.05），但GSK-3β和AKT这两种蛋白的表达差异不显著；qRT-PCR结果证实逆萎康含药血清可以抑制C-myc mRNA（P<0.05）的表达，并且加入抑制剂后抑制作用增强，差异具有显著性。结论：逆萎康通过抑制AKT/GSK-3β/β-catenin信号通路的活化，抑制MC细胞的EMT过程。