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葡萄病毒B CP基因植物表达载体构建及烟草遗传转化
引用本文:任 芳,张尊平,范旭东,胡国君,李正男,董雅凤. 葡萄病毒B CP基因植物表达载体构建及烟草遗传转化[J]. 植物保护, 2018, 44(3): 11-16
作者姓名:任 芳  张尊平  范旭东  胡国君  李正男  董雅凤
作者单位:中国农业科学院果树研究所国家落叶果树脱毒中心
基金项目:国家现代农业产业技术体系建设专项资金(CARS-29-bc-1)
摘    要:葡萄病毒B Grapevine virus B(GVB)是葡萄皱木复合病中栓皮病的病原,为开展抗GVB转基因研究,本研究利用RT-PCR技术克隆GVB外壳蛋白(coat protein,CP)基因,与植物表达载体pRI 101-AN连接构建植物表达载体pRI-GVB CP。采用电击转化法将植物表达载体pRI-GVB CP导入农杆菌LBA4404,并利用农杆菌介导的叶盘转化法将外源基因导入西方烟‘37B’。共获得16个烟草再生株系,PCR检测其中3个株系为阳性,阳性株系播种获得的64株T_1代植株中有30株扩增到目的条带,阳性率为46.9%,表明目的基因GVB cp成功导入烟草并可成功遗传到子代。28株T_1代转基因植株接种病毒进行抗病性鉴定,其中有6株对接种病毒GVB具有抗性。

关 键 词:葡萄病毒B   外壳蛋白基因   植物表达载体   烟草   遗传转化
收稿时间:2017-06-22
修稿时间:2017-10-13

Construction of a plant expression vector of the Grapevine virus B coat protein gene and transformation into Nicotiana tabacum
REN Fang,ZHANG Zunping,FAN Xudong,HU Guojun,LI Zhengnan,DONG Yafeng. Construction of a plant expression vector of the Grapevine virus B coat protein gene and transformation into Nicotiana tabacum[J]. Plant Protection, 2018, 44(3): 11-16
Authors:REN Fang  ZHANG Zunping  FAN Xudong  HU Guojun  LI Zhengnan  DONG Yafeng
Affiliation:National Center for Eliminating Viruses from Deciduous Fruit Trees, Institute of Pomology, Chinese Academy of Agricultural Sciences, Xingcheng 125100, China
Abstract:
Keywords:Grapevine virus B   coat protein gene   plant expression vector   tobacco   genetic transformation
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