| 改造稀有密码子提高SEA蛋白表达量 |
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| 引用本文： | 时成波,吕安国,吴文芳,杨立泉,冯家勋,柏学亮.改造稀有密码子提高SEA蛋白表达量[J].生物工程学报,2002,18(4):477-480. |
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| 作者姓名： | 时成波 吕安国 吴文芳 杨立泉 冯家勋 柏学亮 |
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| 作者单位： | 1. 中国科学院沈阳应用生态研究所,沈阳,110015
2. 广西大学分子遗传研究所 |
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| 基金项目： | 中科院沈阳应用生态研究所与屹昌科技集团合作研究项目~~ |
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| 摘 要： | 利用重叠PCR技术突变了sea基因上一个稀有密码子簇，将此段中稀有密码子全部更换成E.coli最常用密码子，得到seam。将sea和seam分别克隆于7ZTS表达载体上，并转化JM109（DE3）菌株。结果表明，sea基因的表达十分微弱，而seam基因的表达量十分高，约占菌体总蛋白的15 ％。表达产物在体内具有一定的抗肿瘤活性。
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| 关 键 词： | 稀有密码子， 基因突变， 重叠PCR， 表达载体 |
| 文章编号： | 1000-3061(2002)04-0477-04 |
| 修稿时间： | 2001年12月10 |
The Changes of Rare Cordons Increase Expression Level of SEA |
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| SHI Cheng-Bo,\ LU An-Guo,\ WU Wen-Fang,\ YANG Li-Quan,\ FENG Jia-Xun,\ BAI Xue-Liang.The Changes of Rare Cordons Increase Expression Level of SEA[J].Chinese Journal of Biotechnology,2002,18(4):477-480. |
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| Authors: | SHI Cheng-Bo \ LU An-Guo \ WU Wen-Fang \ YANG Li-Quan \ FENG Jia-Xun \ BAI Xue-Liang |
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| Affiliation: | ShenYang Institute of Applied Ecology, Chinese Academy of Science, ShenYang 110015, China. |
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| Abstract: | The rare codons of a fragment in staphylococcal enterotoxin A gene were turned into the most high usage frequency codons in E.coli by overlap PCR technique. Genes of sea and sea m were cloned into 7ZTS expression vector and transformed into JM109(DE3),respectively. The result shows that expression level of sea gene was very low, but the expression level of sea m was as high as 15% of total cell proteins. The expression product shows activity of antitumor in vivo . |
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| Keywords: | expression vector overlap PCR gene mutation rare codons |
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