| 菜粉蝶Pain离子通道基因的克隆和功能研究 |
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| 引用本文： | 毛芬,张晓宇,黄佳,叶恭银. 菜粉蝶Pain离子通道基因的克隆和功能研究[J]. 中国生物防治学报, 2020, 36(6): 905-912. DOI: 10.16409/j.cnki.2095-039x.2020.06.012 |
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| 作者姓名： | 毛芬 张晓宇 黄佳 叶恭银 |
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| 作者单位： | 浙江大学昆虫科学研究所/水稻生物学国家重点实验室/农业农村部作物病虫分子生物学重点实验室, 杭州 310058 |
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| 基金项目： | 浙江省自然科学基金（LR19C140002）；科技部创新人才重点领域推进计划创新团队项目（2016RA4008）；农业农村部杰出农业科技人才创新团队项目 |
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| 摘 要： | 通过克隆十字花科蔬菜重要害虫菜青虫Pieris rapae瞬时感受器电位通道中的Painless（Pain）基因，实现它的体外功能性表达，为进一步研究其在鳞翅目昆虫中的生理功能提供重要依据。根据菜青虫的转录组数据，采用RT-PCR克隆菜青虫Pain基因得到完整开放阅读框；利用哺乳动物表达系统在体外表达菜青虫Pain离子通道。鉴定出菜青虫Pain基因是GenBank登录号为NW_019093434.1的序列。其完成开放阅读框由2850个核苷酸组成，编码949个氨基酸。预测蛋白分子量为108.3 kDa，理论等电点pI为5.37。预测该基因所编码蛋白序列有2个结构域，分别是包含8个锚蛋白重复序列的锚蛋白结构域和6个跨膜区的跨膜结构域。氨基酸序列比对结果显示菜青虫Pain和家蚕、帝王蝶、小菜蛾以及烟草天蛾Pain的序列相似度都高达70%以上，但与黑腹果蝇Pain的序列相似度仅有31%。进化分析结果显示菜青虫Pain离子通道和小菜蛾以及帝王蝶的Pain离子通道的亲缘关系最近。体外钙流检测结果表明，菜青虫Pain离子通道可被43℃缓冲液激活，这说明菜青虫Pain离子通道可以感受高温。
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| 关 键 词： | 菜青虫 Pain 瞬时感受器电位通道 基因克隆 系统进化分析 钙流检测 |
| 收稿时间： | 2020-02-07 |
Cloning and Functional Study of Pain Channel in the Cabbage White Butterfly,Pieris rapae (Lepidoptera: Pieridae) |
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| MAO Fen,ZHANG Xiaoyu,HUANG Jia,YE Gongyin. Cloning and Functional Study of Pain Channel in the Cabbage White Butterfly,Pieris rapae (Lepidoptera: Pieridae)[J]. Chinese Journal of Biological Control, 2020, 36(6): 905-912. DOI: 10.16409/j.cnki.2095-039x.2020.06.012 |
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| Authors: | MAO Fen ZHANG Xiaoyu HUANG Jia YE Gongyin |
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| Affiliation: | State Key Laboratory of Rice Biology/Ministry of Agriculture and Rural Affairs Key Laboratory of Molecular Biology of Crop Pathogens and Insects/Institute of Insect Sciences, Zhejiang University, Hangzhou 310058, China |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Pieris rapae Pain transient receptor potential channel gene clone phylogenetic analysis calcium flux assay |
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