| 地高辛标记cDNA探针检测猪繁殖与呼吸综合征病毒 |
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| 引用本文： | 李广明,姜平,李玉峰,秦承学. 地高辛标记cDNA探针检测猪繁殖与呼吸综合征病毒[J]. 畜牧与兽医, 2007, 39(5): 43-45 |
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| 作者姓名： | 李广明 姜平 李玉峰 秦承学 |
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| 作者单位： | 南京农业大学农业部动物疫病诊断与免疫重点开放实验室,江苏,南京,210095 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金（30471288、30270990）,新世纪优秀人才项目（NCET-04-0502）,教育部博士点基金项目（2003030712）. |
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| 摘 要： | 本研究以猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)S1株ORF7基因为模板,通过RT-PCR技术扩增出394 bp的cDNA。用PCR纯化试剂盒纯化PCR产物,并以此为模板制备出地高辛标记的cDNA探针。特异性试验表明,该探针仅与PRRSV核酸反应,与PPV、PRV、FMDV、HCV及PCV2的核酸反应为阴性。敏感性检测表明,采用CSPD化学发光检测时,硝酸纤维素膜上最低检出量为62.5 pg;尼龙膜上最低检出量为0.5 pg。应用该探针,在尼龙膜上对10份PRRSV阳性病料的组织RNA样品进行检测,结果均为阳性,与RT-PCR检测结果一致,证明该方法可用于PRRSV临床样品检测。
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| 关 键 词： | 地高辛标记 探针 斑点杂交 化学发光 猪呼吸与繁殖障碍综合征病毒 |
| 文章编号： | 0529-5130（2007）05-0043-03 |
| 修稿时间： | 2006-06-17 |
Detection of porcine reproductive and respiratory syndrome by dig-labeled probe |
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