| 羊口疮病毒ORFV114蛋白生物信息学分析、真核表达及亚细胞定位 |
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| 引用本文： | 庞峰,龙琴琴,梁绍波,成虹松,程振涛. 羊口疮病毒ORFV114蛋白生物信息学分析、真核表达及亚细胞定位[J]. 中国畜牧兽医, 2022, 49(11): 4150-4158. DOI: 10.16431/j.cnki.1671-7236.2022.11.005 |
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| 作者姓名： | 庞峰 龙琴琴 梁绍波 成虹松 程振涛 |
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| 作者单位： | 1. 贵州大学动物科学学院, 贵阳 550025;2. 贵州省动物疫病与兽医公共卫生重点实验室, 贵阳 550025 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金项目（32060786）；贵州省科学技术基金（自然科学）（黔科合基础-ZK[2022]一般093）；贵州大学青年教师国家自然科学基金培育项目（贵大培育[2020]42）；贵州大学引进人才科研项目（贵大人基合字（2020）67） |
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| 摘 要： | 【目的】对羊口疮病毒(Orf virus, ORFV)ORFV114蛋白进行生物信息学分析、转录动力学、真核表达及亚细胞定位研究。【方法】使用DNAStar软件对ORFV-JS株ORFV114基因进行序列比对分析；分别使用在线网站ExPASy、TMHMM-2.0、SignalP-5.0、SOPMA、SWISS-MODEL对ORFV114蛋白进行理化性质分析，以及跨膜区、信号肽、结构预测；在阿糖胞苷(cytarabine, Arac)存在或不存在的情况下，于ORFV感染HeLa细胞后多个时间点收获细胞，RT-PCR扩增ORFV114基因，确定ORFV114蛋白的动态转录水平；PCR扩增ORFV114基因，将其亚克隆到真核表达载体pEGFP-N1中，构建pEGFP-ORFV114重组质粒，经酶切、测序鉴定正确后，经脂质体Lipofectamine 3000瞬时转染HEK293细胞，通过Western blotting鉴定ORFV114-EGFP融合蛋白的表达；将pEGFP-N1质粒和pEGFP-ORFV114重组质粒瞬时转染HeLa细胞，24 h后使用Hoechst 33342对细胞核染色...
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| 关 键 词： | 羊口疮病毒(ORFV) ORFV114蛋白 生物信息学分析 转录动力学 真核表达 亚细胞定位 |
| 收稿时间： | 2022-05-18 |
Bioinformatics Analysis,Eukaryotic Expression and Subcellular Localization of Orf Virus ORFV114 Protein |
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| PANG Feng,LONG Qinqin,LIANG Shaobo,CHENG Hongsong,CHENG Zhentao. Bioinformatics Analysis,Eukaryotic Expression and Subcellular Localization of Orf Virus ORFV114 Protein[J]. China Animal Husbandry & Veterinary Medicine, 2022, 49(11): 4150-4158. DOI: 10.16431/j.cnki.1671-7236.2022.11.005 |
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| Authors: | PANG Feng LONG Qinqin LIANG Shaobo CHENG Hongsong CHENG Zhentao |
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| Affiliation: | 1. College of Animal Science, Guizhou University, Guiyang 550025, China;2. Key Laboratory of Animal Diseases and Veterinary Public Health in Guizhou Province, Guiyang 550025, China |
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| Abstract: | |
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