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小鼠H-Y单克隆抗体ELISA检测方法的建立
引用本文:杭苏琴,刘为敏,牛树理,冯紫云. 小鼠H-Y单克隆抗体ELISA检测方法的建立[J]. 中国兽医学报, 2004, 24(6): 547-549
作者姓名:杭苏琴  刘为敏  牛树理  冯紫云
作者单位:南京农业大学,动物科技学院,江苏,南京,210095
摘    要:以纯系 BAL B/ c雄性小鼠脾细胞腹腔注射免疫同系雌性小鼠 9次 ,获得的抗血清经雌、雄鼠脾细胞吸收后用于精子细胞毒性试验 ,测得 H- Y抗血清效价为 1/ 16 0。选取免疫应答最好的雌鼠脾细胞与 SP2 / 0骨髓瘤细胞融合 ,用精子细胞毒性方法筛选效价较高的细胞株制备腹水 ,建立优化的 EL ISA反应条件。优化后的 EL ISA反应条件为 :抗原4℃过夜 ,加 H- Y抗血清 37℃反应 12 0 m in,加 HRP- Ig G 37℃反应 30 min,加 TMB 2 5℃ 30 min。优化后的 EL ISA与常规 EL ISA比较 ,可以明显降低阴性吸光值 ,检测灵敏度从 1/ 32 0上升为 1/ 12 80

关 键 词:脾细胞免疫  精子细胞毒性试验  细胞融合  ELISA  H-Y单抗  小鼠
文章编号:1005-4545(2004)06-0547-03
修稿时间:2003-05-20

ELISA for Determination of Mouse H-Y Monoclonal Antibody
HANG Su-qin,LIU Wei-min,NIU Shu-li,FENG Zi-yun. ELISA for Determination of Mouse H-Y Monoclonal Antibody[J]. Chinese Journal of Veterinary Science, 2004, 24(6): 547-549
Authors:HANG Su-qin  LIU Wei-min  NIU Shu-li  FENG Zi-yun
Abstract:
Keywords:spleen cell intraperitoneal injection  sperm cytotoxicity test  cell fusion  ELISA  H-Y McAb  mouse
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