穿山龙颗粒制剂对自身免疫性甲状腺炎大鼠TLR4/MyD88/NF-κB信号通路的影响 |
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作者姓名: | 钟丰鹰 张程斐 秦慧钊 马知遥 吴丽丽 秦灵灵 刘铜华 |
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作者单位: | 1.北京中医药大学 东方医院,北京 100078;2.北京中医药大学 生命科学学院,北京 102488;3.北京中医药大学 教育部中医养生学重点实验室,北京 100029;4.北京中医药大学 中医养生学研究所,北京 100029;5.北京中医药大学,北京 100029 |
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基金项目: | 国家国际科技合作专项项目(2015DFA30910);北京中医药大学校级科研纵向发展基金项目(2020-ZXFZJJ-005) |
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摘 要: | 目的 通过观察穿山龙颗粒制剂对Toll样受体4(TLR4)/髓样分化因子88(MyD88)/核转录因子-κB(NF-κB)信号通路的影响,探讨其治疗自身免疫性甲状腺炎(AIT)大鼠的作用机制。方法 40只Lewis大鼠采用高碘饮水诱导和猪甲状腺球蛋白佐剂注射的方法制备AIT模型。6周后随机分为模型组、穿山龙低、中、高剂量组(0.52、1.03、2.06 g·kg-1·d-1),每组10只,分别予以0.01 mL·g-1·d-1相应体积混悬液,正常组及模型组大鼠予以同体积去离子水,灌胃8周后取材。取大鼠血清用酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测甲状腺球蛋白抗体(TGAb)、甲状腺过氧化物酶抗体(TPOAb);检测游离三碘甲状腺原氨酸(FT3)、游离甲状腺素(FT4)、促甲状腺激素(TSH)的浓度;取大鼠甲状腺组织行苏木素-伊红(HE)染色,光镜下观察甲状腺组织的病理变化,并用免疫组化法及实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)测定TLR4、MyD88、NF-κB蛋白及mRNA的相对表达量。结果 与正常组比较,模型组大鼠血清中TPOAb、TGAb浓度均显著升高(P<0.01),FT3、FT4显著升高(P<0.01),TSH显著降低(P<0.01);与模型组比较,3个穿山龙剂量组的TPOAb、TGAb浓度均显著下降(P<0.01),穿山龙高剂量组FT3、FT4浓度显著下降(P<0.01),TSH显著升高(P<0.01)。HE染色示模型组甲状腺滤泡间隙存在淋巴细胞浸润,大量滤泡腔被破坏或变小,腔内胶质含量减少,滤泡壁变薄或被破坏,而穿山龙治疗组大鼠甲状腺组织内淋巴细胞浸润较模型组明显减少,甲状腺滤泡结构更为完整。与正常组比较,模型组的TLR4、MyD88、NF-κB蛋白表达显著上调(P<0.01),TLR4、MyD88 mRNA相对表达量显著上调(P<0.01),NF-κB mRNA相对表达量显著上调(P<0.01);与模型组比较,穿山龙高剂量组的TLR4蛋白及mRNA相对表达量显著下调(P<0.05),MyD88蛋白表达显著下调(P<0.01)、mRNA相对表达量显著下调(P<0.05),NF-κB蛋白及mRNA相对表达量均显著下调(P<0.01)。结论 穿山龙颗粒制剂可能通过抑制TLR4/MyD88/NF-κB通路的激活,对自身免疫性甲状腺炎起到治疗作用。
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关 键 词: | 穿山龙颗粒制剂 自身免疫性甲状腺炎 大鼠 Toll样受体4(TLR4)/髓样分化蛋白88(MyD88)/核转录因子-κB(NF-κB)信号通路 |
收稿时间: | 2021-11-27 |
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