| 人KIM-1基因实时荧光定量PCR标准质粒的构建 |
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| 引用本文： | 陈治中,卿吉琳,阳文辉,谭春艳,宁乐平,梁 亮,袁育林,兰会华,赵 林.人KIM-1基因实时荧光定量PCR标准质粒的构建[J].中国临床新医学,2016,9(8):679-683. |
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| 作者姓名： | 陈治中 卿吉琳 阳文辉 谭春艳 宁乐平 梁 亮 袁育林 兰会华 赵 林 |
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| 作者单位： | 530021 南宁，广西壮族自治区人民医院检验科（陈治中，阳文辉，谭春艳，宁乐平，梁 亮，袁育林，兰会华，赵 林），妇科（卿吉琳） |
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| 基金项目： | 广西自然科学基金资助项目（编号：2012GXNSFBA053084）；广西卫计委科研课题（编号：Z2013403） |
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| 摘 要： | 目的制备用于人KIM-1基因mRNA实时荧光定量PCR检测的标准品质粒。方法通过PCR扩增出目的片断,纯化PCR产物与p MD18-T载体连接,转化宿主菌E.coli DH5α,获得阳性克隆;通过PCR扩增鉴定和测序分析,确认重组质粒完整正确。提取重组质粒测定DNA浓度后,10倍倍比稀释,建立KIM-1质粒标准品。结果 KIM-1基因目的片段成功重组至p MD18-T载体上,扩增目的片段长度为131 bp,测序结果证实所构建的质粒序列与NCBI基因库KIM-1序列性一致。结论成功构建KIM-1基因实时荧光定量PCR标准品质粒。
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| 关 键 词： | KIM-1基因 实时荧光定量PCR 重组质粒 标准品 |
| 收稿时间： | 2015/12/8 0:00:00 |
Constructing a plasmid standard for detecting human KIM-1 gene mRNA with real-time fluorescence quantitative PCR |
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| CHEN Zhi-zhong,QING Ji-lin,YANG Wen-hui,et al..Constructing a plasmid standard for detecting human KIM-1 gene mRNA with real-time fluorescence quantitative PCR[J].Chinese Journal of New Clinical Medicine,2016,9(8):679-683. |
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| Authors: | CHEN Zhi-zhong QING Ji-lin YANG Wen-hui |
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| Affiliation: | Constructing a plasmid standard for detecting human KIM-1 gene mRNA with real-time fluorescence quantitative PCR |
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