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呋喃它酮代谢物的可视化免疫亲和凝胶柱检测分析
引用本文:张冬昊,赵桐桐,魏东,李佳仪,何扩.呋喃它酮代谢物的可视化免疫亲和凝胶柱检测分析[J].现代食品科技,2019,35(9):304-310.
作者姓名:张冬昊  赵桐桐  魏东  李佳仪  何扩
作者单位:河北北方学院,河北省农产品食品质量安全分析检测重点实验室,河北张家口075000;唐山市食品药品综合检验检测中心,河北唐山063000;河北北方学院,河北省农产品食品质量安全分析检测重点实验室,河北张家口075000
基金项目:河北省科技攻关重点研发项目(16236802D-5);河北省教育厅科技研发项目(QN206242);河北省重点研发计划项目(18227148)
摘    要:为了建立一种用于检测动物源性食品中呋喃它酮代谢物(AMOZ)的可视化免疫亲和凝胶柱检测方法,利用对醛基苯甲酸(CPA)对AMOZ进行衍生处理得到衍生物CPAMOZ,制备CPAMOZ完全抗原,并通过免疫小鼠获取CPAMOZ多克隆抗体,使用间接ELISA法对抗体的效价及特异性进行测定。实验采用恒温振荡法将溴化氰活化的琼脂糖凝胶分别与CPAMOZ抗体、HRP抗体偶联制得CPAMOZ抗体胶和HRP抗体胶,作为亲和凝胶柱的检测层与质控层。建立AMOZ可视化免疫亲和凝胶柱分析方法,确定了该方法在酶标抗原的稀释倍数为5000、HRP胶稀释20倍、CPAMOZ抗体胶稀释15倍的条件下,达到最佳工作状态。实验结果表明CPAMOZ多克隆抗体效价为1:64000,IC_(50)值为2.19μg/L,具有良好的灵敏度及特异性。建立的AMOZ可视化免疫亲和凝胶检测柱方法检测限为4μg/L,动物源实际样品中AMOZ的检测限为2μg/kg。该方法快速便捷,符合我国高通量筛选食品中AMOZ的要求。

关 键 词:呋喃它酮  抗体  凝胶柱  特异性
收稿时间:2018/12/4 0:00:00

An Immunoaffinity Gel Column Assay for Visualizable Detection of Furaltadone Metabolites
ZHANG Dong-hao,ZHAO Tong-tong,WEI Dong,LI Jia-yi and HE Kuo.An Immunoaffinity Gel Column Assay for Visualizable Detection of Furaltadone Metabolites[J].Modern Food Science & Technology,2019,35(9):304-310.
Authors:ZHANG Dong-hao  ZHAO Tong-tong  WEI Dong  LI Jia-yi and HE Kuo
Affiliation:(1.Key Laboratory of Analysis and Testing of Agricultural Products Food Quality and Safety in Hebei Province, Hebei North University, Zhangjiakou 075000, China) (2.Tangshan Food and Drug Comprehensive Inspection and Testing Center, Tangshan 063000, China),(1.Key Laboratory of Analysis and Testing of Agricultural Products Food Quality and Safety in Hebei Province, Hebei North University, Zhangjiakou 075000, China) (2.Tangshan Food and Drug Comprehensive Inspection and Testing Center, Tangshan 063000, China),(1.Key Laboratory of Analysis and Testing of Agricultural Products Food Quality and Safety in Hebei Province, Hebei North University, Zhangjiakou 075000, China),(1.Key Laboratory of Analysis and Testing of Agricultural Products Food Quality and Safety in Hebei Province, Hebei North University, Zhangjiakou 075000, China) and (1.Key Laboratory of Analysis and Testing of Agricultural Products Food Quality and Safety in Hebei Province, Hebei North University, Zhangjiakou 075000, China)
Abstract:
Keywords:5-methylmorpholin-3-amino2-oxazolone (AMOZ)  antibody  gel column  specificity
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