人珠蛋白信使核糖核酸的制备及其体外翻译 |
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作者姓名: | 齐上乐 王申五 沈岩 吴冠芸 |
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作者单位: | 中国医学科学院基础医学研究所 北京(齐上乐,王申五,沈岩),中国医学科学院基础医学研究所 北京(吴冠芸) |
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摘 要: | 本文以新生儿ABO血型不配溶血换得的血网织红细胞为材料,用酚-氯仿提取及Oligo(dT)纤维素亲和层析制备了人珠蛋白mRNA。并在变性条件下经琼脂糖凝胶电泳鉴定,证明它是9~10S的RNA。人珠蛋白mRNA在兔网织红细胞溶解物与麦胚体外翻译体系中的翻译活性与其浓度均有依赖关系。用SDS-聚丙烯酰胺凝胶不连续电泳及萤光显影鉴定了无细胞体系的翻译产物为人珠蛋白;并以醋酸纤维膜电泳分析了体外合成的人珠蛋白肽链组成,结果表明新生儿血中珠蛋白mRNA合成的α、β、γ珠蛋白肽链之比为3:1:2。
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