| 特异性siRNA质粒的构建及其抑制癌细胞中mcl-1表达的研究 |
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| 引用本文： | 徐爱群,曹以诚,区镜深,张珍武.特异性siRNA质粒的构建及其抑制癌细胞中mcl-1表达的研究[J].现代食品科技,2010,26(8):789-792,783. |
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| 作者姓名： | 徐爱群 曹以诚 区镜深 张珍武 |
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| 作者单位： | 华南理工大学生物科学与工程学院,广东广州,510006 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金，教育部中国网格计划生物信息网格平台子项目，国家科技基础条件平台项目，科技部基础学科平台建设生物计算网络平台项目，广州市科技攻关计划 |
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| 摘 要： | 本文构建了靶向mcl-l基因构建的特异性siRNA重组质粒,在细胞水平检测的其抑制效果,并筛选出能高效抑制mcl-l基因表达的siRNA重组质粒,针对mcl-1的特异性siRNA重组质粒,将其转染到人肝癌细胞HepG2,用Rt-PCR(实时荧光定量PCR)方法和WesternBlot方法分别检测转染前后mcl-1mRNA水平和Mcl-1蛋白表达水平,比较对应不同位点的两个siRNA重组质粒对mcl-1的抑制效果。结果表明,Rt-PCR结果显示对应不同位点的两个siRNA重组质粒对mcl-1均可降低mcl-1mRNA水平,最大抑制效率达70.0%,远高于作为对照非相关组;Western-Blot结果显示转染特异性siRNA重组质粒后Mcl-1蛋白表达受到抑制,最大抑制率为44.2%。合理设计的特异性siRNA重组质粒可大幅度下调mcl-1mRNA水平,能有效抑制Mcl-1蛋白表达。
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| 关 键 词： | 肝癌 mcl-1 基因沉默 实时荧光定量PCR |
The Specific siRNA Plasmids Construction and their Inhibition Effect on Expression of mcl-1 Protein in Liver Cancer Cell |
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| XU Ai-qun,CAO Yi-cheng,OU Jing-shen,ZHANG Zhen-wu.The Specific siRNA Plasmids Construction and their Inhibition Effect on Expression of mcl-1 Protein in Liver Cancer Cell[J].Modern Food Science & Technology,2010,26(8):789-792,783. |
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| Authors: | XU Ai-qun CAO Yi-cheng OU Jing-shen ZHANG Zhen-wu |
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| Keywords: | mcl-1 |
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