| 里氏木霉RutC30常温常压等离子体(ARTP)诱变筛选pyr4基因缺陷型菌株及转化系统的建立 |
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| 引用本文： | 安莉颖,易欣欣,秦丽娜,施思,陶勇,伍红,董志扬.里氏木霉RutC30常温常压等离子体(ARTP)诱变筛选pyr4基因缺陷型菌株及转化系统的建立[J].菌物学报,2014(6):1272-1280. |
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| 作者姓名： | 安莉颖 易欣欣 秦丽娜 施思 陶勇 伍红 董志扬 |
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| 作者单位： | 西南民族大学生命科学与技术学院;北京农学院食品科学与工程学院;中国科学院微生物研究所; |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金(No.30970073);国家重点基础研究发展规划(973项目)(No.2011CB707402);国家高技术研究发展计划(863计划)(No.2012AA092103) |
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| 摘 要： | 以里氏木霉Trichoderma reesei重要工业生产菌Rut C30为出发菌株,通过等离子体(ARTP)诱变筛选,以5‐氟乳清酸(5‐FOA)和尿苷(Uridine)进行筛选,获得一株pyr4基因缺陷株Rut C30ΔU3。用含有野生型里氏木霉pyr4基因的互补质粒转化突变株,可回复野生性状。经测序发现其pyr4基因在核酸序列多个位点发生突变,其中包括两个错义突变和一个移码突变,从而导致乳清酸核苷‐5′‐磷酸脱羧酶失活。经遗传稳定性研究分析,传代5次后仍保持良好的尿苷依赖性、去葡萄糖阻遏以及高产纤维素酶特性。经实验筛选获得了pyr4基因缺陷菌株可作为基因表达系统的受体菌株,建立了以尿苷营养缺陷为筛选标记的木霉转化系统。
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| 关 键 词： | 里氏木霉 等离子体 诱变 pyr4基因 |
Isolation of Trichoderma reesei RutC30 pyr4 gene mutant by atmos-pheric room temperature plasma (ARTP) and establishment of a trans-formation system |
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