| G156A MGMT体外定点诱导突变及逆转录病毒载体的构建 |
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| 引用本文： | 肖芸,王季石,任志绢,方琴,孙等军,张维,张旭,吴镇宇.G156A MGMT体外定点诱导突变及逆转录病毒载体的构建[J].贵州医药,2002,26(9):771-773. |
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| 作者姓名： | 肖芸 王季石 任志绢 方琴 孙等军 张维 张旭 吴镇宇 |
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| 作者单位： | 1. 贵阳医学院检验系临床血液教研室,550004
2. 贵阳医学院附属医院,550004 |
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| 基金项目： | 贵州省科委基金资助项目 (D2 0 0 0 5 ) |
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| 摘 要： | 目的：获得含突变位点G156A（第156位点的甘氨酸突变为丙氨酸）的六氧甲基鸟嘌呤－DNA－甲基转移酶（O^6-methylguanine-DNA-methyltransferase,MGMT)，并构建含G156A MGMT（△MGMT)的逆转录病毒载体。方法：通过体外定点诱导突变技术产生G156A突变的MGMT，将其克隆入pGEM-T载体，进一步亚克隆至G1Na逆转录病毒载体。结果：通过DNA测序分析证实预期位点GGC（甘氨酸）突变为GCC（丙氨酸），经PCR及酶切分析证实成功构建了逆转录病毒载体G1Na-△MGMT。结论：通过体外定点诱导突变技术成功获得了G156A MGMT，并运用基因重组技术构建了逆转录病毒表达载体G1Na-△MGMT，为进一步将G156A MGMT转导造血干细胞对化疗药物抗性的研究奠定了基础。
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| 关 键 词： | 六氧甲基鸟嘌呤－DNA－甲基转移酶 G156A 体外定点诱导突变 逆转录病毒载体 |
Site-directed rnutagenesis in vitro generate G156A MGMT and Construction of Retrovirus Vector |
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| Xiao Yun,Wang Jishi,Ren Zhijuan,et al..Site-directed rnutagenesis in vitro generate G156A MGMT and Construction of Retrovirus Vector[J].Guizhou Medical Journal,2002,26(9):771-773. |
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| Authors: | Xiao Yun Wang Jishi Ren Zhijuan |
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| Affiliation: | Xiao Yun,Wang Jishi,Ren Zhijuan,et al. Guiyang Medical College,Guiyang 550004 |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | O 6 methylguanine DNA methyltransferase G156A Site directed mutagenesis Retrovirus vector |
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