温度和酸度对田鼠型鼠疫耶尔森菌psa位点的转录调控研究 |
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引用本文: | 刘子中,张义全,周冬生,杨瑞馥,韩延平.温度和酸度对田鼠型鼠疫耶尔森菌psa位点的转录调控研究[J].军事医学科学院院刊,2013(8):587-590. |
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作者姓名: | 刘子中 张义全 周冬生 杨瑞馥 韩延平 |
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作者单位: | 军事医学科学院微生物流行病研究所,病原微生物生物安全国家重点实验室,北京100071 |
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基金项目: | 国家自然科学基金资助项目(30930001,30900823) |
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摘 要: | 目的研究温度和酸度对田鼠型鼠疫耶尔森菌psa位点的转录调控作用。方法首先设计相关跨基因引物,用RT-PCR方法验证psa位点的相关操纵子结构。扩增操纵子首基因上游启动子区500 nt序列,并克隆入pRW50质粒β-半乳糖苷酶基因的上游,将重组质粒转入鼠疫菌中,通过测定β-半乳糖苷酶活性差异来判断不同温度(26和37℃)和酸度(pH 6.0和pH 8.0)对psaE和psaA的调控关系。最后提取鼠疫菌在上述不同温度和酸度条件下的总RNA,采用引物延伸实验进一步明确温度和酸度对psaA的调控关系。结果与结论 RT-PCR结果证实了田鼠型鼠疫菌的psa位点由操纵子psaEF和psaABC构成;半乳糖苷酶和引物延伸实验结果显示在37℃、pH 6.0培养条件下psaABC的转录水平最高,而psaEF的转录水平无明显变化,提示psaA的表达水平在37℃酸性条件下表达量最高,psaE则不受温度和酸度的调控。
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关 键 词: | 田鼠型鼠疫耶尔森菌 转录调控 温度 酸度 psa位点 |
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