小檗碱预处理拮抗过氧化氢所致PC12细胞的损伤：抗氧化自由基效应

背景: 小檗碱是从中药黄连中分离提取的生物碱，研究表明有抗菌、抗炎、抗肿瘤、抗氧化和降血脂等药理作用。但其对过氧化氢诱导的神经元损伤是否有保护作用尚未见报道。 目的: 观察过氧化氢诱导损伤PC12细胞接受小檗碱干预的变化，并分析其作用机制。 设计、时间及地点: 重复测量，体外细胞生化水平对比实验。实验于2007-9/2009-7在广东医学院完成。 材料: PC12细胞由广东医学院张海涛教授赠送；小檗碱、二氯二乙酸荧光素和二甲基亚砜购于美国Sigma公司；过氧化氢购于广州化学试剂厂；马血清和胎牛血清购于杭州四季青生物工程公司；乳酸脱氢酶（LDH）和丙二醛（MDA）试剂盒为南京建成生物工程研究所产品。 方法: PC12培养于内含体积分数100 ml/L马血清和50 ml/L胎牛血清的DMEM培养液中，隔日换液，根据实验需要将细胞分为3组，小檗碱组：将浓度分别为1，3，10μmol/L丹皮酚加入培养液，1h后将过氧化氢加入培养液；空白组：细胞以正常培养液培养；过氧化氢组：细胞仅加入过氧化氢。 主要观察指标: 采用MTT还原法检测细胞生存率；流式细胞仪检测细胞内活性氧；化学比色法测定乳酸脱氢酶(LDH)活性及细胞内丙二醛(MDA)含量。 结果: 过氧化氢组PC12细胞生存率明显低于空白组，差异比较有显著性意义(P<0.01)，小檗碱组不同浓度条件下细胞生存率均显著高于过氧化氢组，差异比较有显著性意义(P<0.01)；过氧化氢组PC12细胞LDH 活性、细胞内活性氧及丙二醛含量显著高于空白组，差异比较有显著性意义(P<0.01)，小檗碱组不同浓度条件下LDH 活性、细胞内活性氧及丙二醛含量均低于过氧化氢组(P < 0.05~0.01)。 结论:小檗碱对过氧化氢所致PC12细胞损伤有保护作用，且该作用可能与其抗氧化作用途径有关。