| 大鼠脊髓损伤修复差异表达cDNA文库的构建 |
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| 引用本文： | 马振莲,李欣,赵忠良,刘少君. 大鼠脊髓损伤修复差异表达cDNA文库的构建[J]. 中国神经科学杂志, 2004, 20(4): 281-285 |
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| 作者姓名： | 马振莲 李欣 赵忠良 刘少君 |
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| 作者单位： | 军事医学科学院基础医学研究所 北京100850(马振莲，李欣)，第四军医大学基础部 西安710032(赵忠良)，军事医学科学院基础医学研究所 北京100850(刘少君) |
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| 基金项目： | 国家重点基础研究发展规划项目(973)(001CB510206) |
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| 摘 要： | 目的 运用改良消减杂交技术构建大鼠脊髓损伤修复过程中出现的差异表达基因文库 ,为寻找在脊髓损伤后的修复过程中起关键作用的分子提供帮助。方法 在经典消减杂交的基础上引进SMART反转录、长距离PCR、磁性分离系统、离心柱色谱等方法建立改良消减杂交技术 ,通过两轮消减杂交构建差异表达基因的cDNA消减文库 ,并对文库中的差异基因进行批量克隆与生物信息学分析。结果 将两轮消减杂交后的差异表达基因转化大肠杆菌JM10 9以建立差异表达基因文库 ,库容量大小为 2× 10 3。从文库中随机挑取 90个克隆进行酶切鉴定与测序分析 ,得到 4 0个差异基因序列 ,其中 32个已知序列 ,8个新序列。 结论 通过改良消减杂交成功建立了脊髓损伤修复过程中出现的差异表达基因文库 ,为筛选在大鼠脊髓损伤修复过程中起关键作用的基因 ,进一步探讨脊髓损伤修复的分子机制奠定了基础
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| 关 键 词： | 脊髓损伤 差异表达基因 文库 消减杂交 |
Construction of a subtractive library of genes differentially expressed during spinal cord injury and regeneration |
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| MA Zhen-lian. Construction of a subtractive library of genes differentially expressed during spinal cord injury and regeneration[J]. Neuroscience Bulletin, 2004, 20(4): 281-285 |
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| Authors: | MA Zhen-lian |
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| Affiliation: | MA Zhen-lian~ |
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| Keywords: | spinal cord injury differentially expressed gene library subtractive hybridization |
| 本文献已被 CNKI 等数据库收录！ |
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