miR-382-5p过表达介导PTEN的表达下调对人脑胶质瘤U251细胞恶性生物学行为的影响

  目的  探究miR-382-5p过表达对人脑胶质瘤U251细胞恶性生物学行为的影响。  方法  将miR-382-5p mimic转染入U251细胞，逆转录-聚合酶链反应检测miR-382-5p、磷酸酶-张力蛋白同源物（PTEN） mRNA水平；生物信息学预测miR-382-5p与PTEN存在碱基结合位点，构建PTEN pcDNA载体过表达，荧光素酶报告实验检测miR-382-5p与PTEN靶向关系，将细胞随机分为4组:Control组、mimics组、pc-PTEN组和mimics+pc-PTEN组进行后续实验，逆转录-聚合酶链反应检测各组细胞PTEN水平；克隆形成法检测细胞增殖；逆转录-聚合酶链反应检测Ki67、 Survivin、 c-Myc mRNA水平；Transwell检测细胞侵袭能力；蛋白免疫印迹检测E-cadherin、N-cadherin、Vimentin蛋白表达水平。  结果  miR-382-5p和PTEN存在直接靶向作用关系，与Control组相比较，mimics组miR-382-5p mRNA水平升高（P<0.05），PTEN mRNA水平降低（P<0.05），细胞克隆形成率降低（P<0.05），Ki67、Survivin mRNA水平降低（P<0.05），c-Myc mRNA水平升高（P<0.05），细胞侵袭数降低（P<0.05），E-cadherin蛋白水平升高（P<0.05），N-cadherin、Vimentin蛋白水平降低（P<0.05）。pc-PTEN组miR-382-5p mRNA水平降低（P<0.05），PTEN mRNA水平升高（P<0.05），细胞克隆形成率升高（P<0.05），Ki67、Survivin mRNA水平升高（P<0.05），c-Myc mRNA水平降低（P<0.05），细胞侵袭数升高（P<0.05），E-cadherin蛋白水平降低（P<0.05），N-cadherin、Vimentin蛋白水平升高（P<0.05）；与pc-PTEN组相比较，mimics+pc-PTEN组miR-382-5p mRNA水平升高（P<0.05），PTEN mRNA水平降低（P<0.05），细胞克隆形成率降低（P<0.05），Ki67、Survivin mRNA水平降低（P<0.05），c-Myc mRNA水平升高（P<0.05），细胞侵袭数降低（P<0.05），E-cadherin蛋白水平升高（P<0.05），N-cadherin、Vimentin蛋白水平降低（P<0.05）。  结论  miR-382-5p过表达介导PTEN的表达下调可抑制胶质瘤U251细胞增殖、侵袭、生长和上皮细胞-间充质转化。

Overexpression of miR-382-5p Overexpression Mediated Downregulation of PTEN on Malignant Biological Behavior of Human Glioma U251 Cells