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| 人白细胞介素12双亚基共表达真核载体的构建 | |
| 引用本文： | 羊东晔,卢放根,赵水平,汤熙翔,刘小伟,吴小平.人白细胞介素12双亚基共表达真核载体的构建[J].中南大学学报(医学版),2003,28(4):338-342. |
| 作者姓名： | 羊东晔 卢放根 赵水平 汤熙翔 刘小伟 吴小平 |
| 作者单位： | 1. 中南大学湘雅二医院消化内科,长沙,410011 2. 中南大学湘雅二医院心内科,长沙,410011 3. 生生基因药物研究所,长沙,410008 |
| 基金项目： | 国家自然科学基金 (编号 395 70 335 )，科技部博士新药创新基金，医学遗传学国家重点实验室开放课题基金 |
| 摘 要： | 目的 :为满足基因治疗的需要构建人白细胞介素 12 (hIL 12 )双亚基共表达质粒。方法 :先从人胚肾组织的逆转录产物中用PCR方法扩增出它的两个亚基P4 0 和P3 5的cDNA全长 ,分别克隆入真核表达载体pcDNA3.1(+/ )中构建单亚基质粒———P(+) /P4 0 和P( ) /P3 5,然后再将二者串联克隆入真核表达载体 pcDNA3.1(+)中得到P(+) /IL 12质粒。脂质体转染HepG2后 2 4,48hELISA检测细胞培养上清内hIL 12蛋白质表达。结果 :P(+) /IL 12质粒经酶切和测序证明两亚基连接方向正确 ,序列无突变 ;ELISA检测细胞上清结果证实可表达hIL 12蛋白质。结论 :成功构建P4 0 和P3 5双亚基真核共表达质粒———P(+) /IL 12 ,为模拟hIL 12生理表达方式 ,简化hIL 12基因治疗操作奠定了基础。 |
| 关 键 词： | 人白细胞介素12 基因 克隆 真核表达载体 |
| 文章编号： | 1000-5625(2003)04-0338-05 |
| 修稿时间： | 2002年6月10日 |
Construction of double-subunit co-expression eukaryotic vector of human interleukin 12 |
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| YANG Dong-ye ,LU Fang-gen ,ZHAO Shui-ping ,et al..Construction of double-subunit co-expression eukaryotic vector of human interleukin 12[J].Journal of Central South University (Medical Sciences)Journal of Central South University (Medical Sciences),2003,28(4):338-342. | |
| Authors: | YANG Dong-ye LU Fang-gen ZHAO Shui-ping |
| Affiliation: | (1.Department of Gastroenterology; 2. Department of Cardiovasology,Second Xiangya Hospital, Central South University, Changsha 410011, China) |
| Abstract: | |
| Keywords: | human interleukin 12 genes clone eukaryotic expression vector |
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