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肠侵袭性大肠杆菌DPO-PCR检测方法的建立与应用北大核心CSCD
作者姓名:李丹丹  徐义刚  邱索平  王昱  高会江  高慎阳
作者单位:1.海南出入境检验检疫局检验检疫技术中心570311;2.黑龙江出入境检验检疫局检验检疫技术中心150001;3.从化出入境检验检疫局510900;4.重庆出入境检验检疫局检验检疫技术中心404100;5.中国农业科学院北京畜牧兽医研究所牛遗传育种研究室100193;6.辽宁医学院畜牧兽医学院121001;
基金项目:海南省社会发展科技专项(2015SF29);国家质检总局科技项目(2013IK031;2013IK051;2015IK089);重庆市科技计划项目(cstc2014yykfA80017);海南省应用技术研究与开发专项项目(ZDXM20130025);广东检验检疫局科技计划项目(2011GDK44;2013GDK04)~~
摘    要:目的为建立肠侵袭性大肠杆菌(EIEC)的DPO-PCR快速检测方法。方法本研究以EIECipaH基因为靶基因设计了一对双启动寡核苷酸(DPO)引物,建立了EIEC DPO-PCR检测方法。结果退火温度范围在47℃~67℃内都能有效地扩增出目的基因,表明该检测方法对退火温度不敏感;该DPO引物仅与EIEC的扩增反应呈阳性,而与其他菌株无非特异性扩增反应,表明该方法特异性强;该方法的灵敏度为1.17×102 cfu/mL。利用该检测方法对采集的230份样品进行检测,共计检出3份EIEC阳性样品,与国标法(GB 4789.6-2003)检测结果一致,显示了良好的实用性。结论该DPO-PCR方法设计简单、特异性强,具有良好的实用性。

关 键 词:肠侵袭性大肠杆菌  ipaH基因  DPO-PCR
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