甘利欣对肺纤维化大鼠的TGF-β1、IFN-γ、IL-4的影响

目的: 建立大鼠肺纤维化动物模型,探讨甘利欣治疗博莱霉素致肺纤维化大鼠的作用机制。 方法: 将SD级雄性大鼠60只,体重(180±20)g,随机分成4组:博莱霉素所致大鼠肺纤维化模型组(BLM组)、生理盐水对照组、甘利欣治疗组、地塞米松(Dexamethasone,DXM)治疗组,每组10只。博莱霉素致肺纤维化动物模型第28 d开始,各治疗组在每天同一时间段内连续14 d腹腔内注射。治疗的剂量分别为地塞米松注射液3 mg/(kg ·d)(浓度为5 mg/mL)、甘利欣150 mg(kg ·d);在治疗后第15 d取大鼠左肺下叶1 cm×1 cm×l cm大小的组织,固定于10%甲醛溶液,供免疫组化TGF-β₁、IFN-γ、IL-4表达观察;同样取大鼠右肺下叶供HE染色病理观察。抽取大鼠6~8 mL血液静置30 min后中速离心15 min,取其血清用ELISA双抗体夹心法测定各组大鼠血清TGF-β₁ IL-4、IFN-γ含量。 结果: ①采用分级方法定性评价HE染色大鼠肺组织的肺纤维化程度,发现甘利欣治疗组、DXM治疗组大鼠肺纤维化程度均较轻微。②模型组大鼠肺组织TGF-β₁染色呈强阳性反应,IFN-γ染色较淡,而甘利欣治疗组、DXM治疗组TGF-β₁、IFN-γ染色则相反。免疫组化TGF-β₁定量分析结果显示:与模型组均数相比,对照组、地塞米松组、甘利欣组的P值分别为0.007,0.000,0.001;而甘利欣组与地塞米松组相比,P值为0.018。免疫组化IFN-γ定量分析:模型组与甘利欣组、地塞米松组相比,P值分别为0.004,0.010;而甘利欣组与地塞米松组相比,P值为0.618。③模型组大鼠血清TGF-β₁,IL-4含量较高,IFN-γ含量较低,而甘利欣治疗组、DXM治疗组则相反。模型组大鼠血清TGF-β₁均数与对照组、地塞米松组、甘利欣组相比,P值分别为0.008,0.044,0.005;地塞米松组与甘利欣组相比P值0.169。模型组大鼠血清IL-4均数与对照组、地塞米松组、甘利欣组相比,P值分别为0.013,0.029,0.013,地塞米松组、甘利欣组两两相比无差异(P>0.05)。地塞米松组、甘利欣组大鼠血清IFN-γ均数两两相比无差异(P=0.389),但两者与模型组相比P值分别为0.001,0.000。 结论: 甘利欣可以减轻大鼠肺纤维化损伤和肺组织的TGF-β₁、IL-4的表达,并降低他们在血清中的含量,增加血清中的IFN-γ含量,增强肺组织IFN-γ的表达,为临床治疗肺纤维化提供理论支持。