小分子干扰RNA沉默高迁移率族蛋白B1抑制肝星状细胞Ⅰ型和Ⅲ型胶原合成* |
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作者姓名: | 葛文松 范建高 李光明 |
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作者单位: | 200092 上海市 上海交通大学医学院附属新华医院消化内科 |
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基金项目: | 国家自然科学基金项目(编号:81200279) |
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摘 要: | 目的 研究小分子干扰RNA(siRNA)干扰高迁移率族蛋白B1(HMGB 1)表达对肝星状细胞(HSC) Ⅰ型和Ⅲ型胶原表达的影响。方法 将化学合成的HMGB 1基因特异性siRNA以脂质体包裹,转染HSC-T6细胞,设阴性对照和空白对照,抽提细胞总RNA和蛋白质,采用Western blot法检测细胞Ⅰ型和Ⅲ型胶原表达情况;采用细胞免疫荧光法检测Ⅰ型和Ⅲ型胶原表达与定位;采用酶联免疫吸附法检测培养上清液中Ⅰ型和Ⅲ型胶原水平。结果 转染HMGB 1基因特异性siRNA的HSC-T6细胞Ⅰ型和Ⅲ型胶原蛋白水平显著下调,免疫细胞化学检测也提示转染siRNA 后细胞内Ⅰ型和Ⅲ型胶原水平较对照组明显降低;在培养72 h时,上清液Ⅰ型胶原和Ⅲ型胶原水平分别较对照组下降了(46.36±3.82) %和(41.92±3.58) %(F=33.14,P<0.01;F=27.56,P<0.01)。结论 HMGB 1特异性siRNA能高效抑制HSC-T6细胞胶原的合成和分泌,因而可能具有预防和治疗肝纤维化的潜力。
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关 键 词: | 肝星状细胞 小分子干扰RNA 高迁移率族蛋白B1 胶原 |
收稿时间: | 2015-01-14 |
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