小鼠α1,3-半乳糖基转移酶基因的克隆及其重组真核表达载体的构建 |
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引用本文: | 郭军,丁杰,喻召才,李韧,郭长存,樊代明.小鼠α1,3-半乳糖基转移酶基因的克隆及其重组真核表达载体的构建[J].第四军医大学学报,2003,24(1):37-39. |
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作者姓名: | 郭军 丁杰 喻召才 李韧 郭长存 樊代明 |
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作者单位: | 第四军医大学西京医院消化病研究所,陕西,西安,710033 |
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摘 要: | 目的:构建α1,3-半乳糖基转移酶的重组真核表达质粒pcDNA3.1/V5-HisAα1,3GT,为进一步利用其进行胃癌的基因治疗奠定基础。方法:从BALB/c小鼠腹腔巨噬细胞中提取总RNA,行RT-PCR扩增出编码α1,3-半乳糖基转移酶的全长cDNA,并克隆入pUCm-T测序载体。经DNA测序证实序列无误后,将α1,3-半乳糖基转移酶基因片段亚克隆入pcDNA3.1/V5-HisA真核表达载体。结果:经RT-PCR扩增出大小约为1.2kb的基因片段,成功克隆入pUCm-T载体。经DNA测序证实为α1,3-半乳糖基转移酶(α1,3-galactosyltransferase,3GT),大小为1221bp,编码序列及读框均正确。经亚克隆酶切鉴定,获得携有α1,3GT基因的重组质粒pcNDA3.1/V5-HisAα1,3GT。结论:成功地构建α1,3GT真核表达载体,为进行肿瘤基因治疗奠定了基础。
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关 键 词: | α1 3-半乳糖基转移酶 Galα(1 3)Gal RT-PCR 克隆 胃癌 基因治疗 |
文章编号: | 1000-2790(2003)01-0037-03 |
修稿时间: | 2002年4月2日 |
Cloning of the murineα1,3-galactosyltransferase and construction of its recombinant eukaryotic expression vector |
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Abstract: | |
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Keywords: | RT-PCR |
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