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小鼠α1,3-半乳糖基转移酶基因的克隆及其重组真核表达载体的构建
引用本文:郭军,丁杰,喻召才,李韧,郭长存,樊代明.小鼠α1,3-半乳糖基转移酶基因的克隆及其重组真核表达载体的构建[J].第四军医大学学报,2003,24(1):37-39.
作者姓名:郭军  丁杰  喻召才  李韧  郭长存  樊代明
作者单位:第四军医大学西京医院消化病研究所,陕西,西安,710033
摘    要:目的:构建α1,3-半乳糖基转移酶的重组真核表达质粒pcDNA3.1/V5-HisAα1,3GT,为进一步利用其进行胃癌的基因治疗奠定基础。方法:从BALB/c小鼠腹腔巨噬细胞中提取总RNA,行RT-PCR扩增出编码α1,3-半乳糖基转移酶的全长cDNA,并克隆入pUCm-T测序载体。经DNA测序证实序列无误后,将α1,3-半乳糖基转移酶基因片段亚克隆入pcDNA3.1/V5-HisA真核表达载体。结果:经RT-PCR扩增出大小约为1.2kb的基因片段,成功克隆入pUCm-T载体。经DNA测序证实为α1,3-半乳糖基转移酶(α1,3-galactosyltransferase,3GT),大小为1221bp,编码序列及读框均正确。经亚克隆酶切鉴定,获得携有α1,3GT基因的重组质粒pcNDA3.1/V5-HisAα1,3GT。结论:成功地构建α1,3GT真核表达载体,为进行肿瘤基因治疗奠定了基础。

关 键 词:α1  3-半乳糖基转移酶  Galα(1  3)Gal  RT-PCR  克隆  胃癌  基因治疗
文章编号:1000-2790(2003)01-0037-03
修稿时间:2002年4月2日

Cloning of the murineα1,3-galactosyltransferase and construction of its recombinant eukaryotic expression vector
Abstract:
Keywords:RT-PCR
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