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制备性SDS—PAGE纯化大肠杆菌表达的重组人VEGF
引用本文:杨亚东 卢传义. 制备性SDS—PAGE纯化大肠杆菌表达的重组人VEGF[J]. 高技术通讯, 1994, 4(3): 28-31
作者姓名:杨亚东 卢传义
作者单位:北京医科大学心血管基础研究所分子生物学研究室
摘    要:在利用基因工程方法实现大肠杆菌表达外源重组人VEGF的基础上,应用制备性SDS-PAGE从包涵体中分离纯化了这一因子。纯化蛋白在含有氧化型与还原型谷胱甘肽和肝素的缓冲液中复性,复性后的VEGF蛋白成为同源双体,经Miles方法检测,证明可提高血管通透性,具有生物活性。这一研究为制备具有生物活性的重组人VEGF蛋白,从而开展有关其生理与病理意义的研究奠定了基础。

关 键 词:血管透因子 生物活性 制备

Isolation and Bioactivity Recovery of RecombinantHuman VEGF from the Procaryotic Expression Products in E. coli
Yang Yadong, Lu Chuanyi, Wang Guichun, Yang Hong, Zhu Xiaojun,Zhou Airu, Tang Jian, Ma Dalong, Li Daizong. Isolation and Bioactivity Recovery of RecombinantHuman VEGF from the Procaryotic Expression Products in E. coli[J]. High Technology Letters, 1994, 4(3): 28-31
Authors:Yang Yadong   Lu Chuanyi   Wang Guichun   Yang Hong   Zhu Xiaojun  Zhou Airu   Tang Jian   Ma Dalong   Li Daizong
Affiliation:(received Nov. 8,1993,revised Dec. 18)Yang Yadong, Lu Chuanyi, Wang Guichun, Yang Hong, Zhu Xiaojun,Zhou Airu, Tang Jian, Ma Dalong, Li Daizong(Lab. of Molec. Biology,lust. of Cardiovascular Basic Research,Beijing Medical Unly.,Beijing 100083)
Abstract:On the basis of expressing recombinant human VEGF in E. coli we reported earlier, in this study wereport the isolation and bioactivity recovery of this factor from the procaryotic expression products. Isolatedrecombinant human VEGF is renatured in buffer containing oxidizedand reduced glutathione and heparin,the renatured VEGF forms homodimer shown in non-reduced analytical SDS-PAGE. Miles assay shows therenatured VEGF promotes vessel permeability in dose-potency manner.
Keywords:VEGF   VPF   Preparative SDS-PAGE   renaturation   Miles assay
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