| p53基因249M和273H突变在肝癌细胞系HepG2中与热休克蛋白70定位关系的研究 |
| |
| 引用本文： | 刘振锋,王茜,杨守京.p53基因249M和273H突变在肝癌细胞系HepG2中与热休克蛋白70定位关系的研究[J].细胞与分子免疫学杂志,2009,25(4). |
| |
| 作者姓名： | 刘振锋 王茜 杨守京 |
| |
| 作者单位： | 第四军医大学西京医院病理科,陕西,西安,710032 |
| |
| 基金项目： | 军队医药卫生科研基金 |
| |
| 摘 要： | 目的:定点突变合成p53基因突变子,构建绿色荧光蛋白表达载体,进而观察其在HepG2细胞中与内源性热休克蛋白70的共定位关系.方法:以野生型p53为模板,采用PCR体外定点突变技术通过重叠延伸法2次PCR扩增得到目的基因片段,进一步将其克隆到绿色荧光蛋白载体pEGFP-C3中.将构建好的载体转染到HepG2 细胞中,利用免疫荧光染色法检测内源性热休克蛋白70的表达,利用荧光显微镜观察hsp70与p53的共定位关系.结果:测序结果显示片段插入正确,在预期位点发生了点突变,249位氨基酸由AGG突变为AGC,273位氨基酸由CGT突变为CAT.载体成功构建.转染后观察到热休克蛋白70与273H p53共同定位于肝癌细胞系HepG2的胞质,而wt p53与249M p53均定位于细胞核.结论:热休克蛋白70与不同点突变的p53在肝癌细胞系HepG2中的共定位关系与之前我们在肝癌组织中发现的hsp70与p53共定位关系不同,这些提示在hsp70与p53的共定位关系和相互作用上存在某种尚未阐明的机制.
|
| 关 键 词： | 基因 p53 定点突变 热休克蛋白70 转染 |
The colocalized relationship between p53 mutants 249M,273H and hsp70 in HepG2 cells |
| |
| LIU Zhen-feng,WANG Qian,YANG Shou-jing.The colocalized relationship between p53 mutants 249M,273H and hsp70 in HepG2 cells[J].Journal of Cellular and Molecular Immunology,2009,25(4). |
| |
| Authors: | LIU Zhen-feng WANG Qian YANG Shou-jing |
| |
| Abstract: | |
| |
| Keywords: | |
| 本文献已被 维普 万方数据 等数据库收录！ |
|
