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HPV16E6蛋白与hDaxx在HeLa细胞的定位及对凋亡的影响
引用本文:陈苏芳,朱翠明,唐双阳,余敏君,粟盛梅,阳帆,万艳平. HPV16E6蛋白与hDaxx在HeLa细胞的定位及对凋亡的影响[J]. 中华皮肤科杂志, 2012, 45(6)
作者姓名:陈苏芳  朱翠明  唐双阳  余敏君  粟盛梅  阳帆  万艳平
作者单位:1. 湘南学院预防医学与医学检验系,湖南郴州,423000
2. 南华大学病原生物学研究所,湖南衡阳,421001
3. 湘南学院基础医学课部
基金项目:国家自然科学基金,湖南省高校创新团队经费资助
摘    要:目的 探讨外源人乳头瘤病毒16型E6蛋白(HPV16 E6)与人Daxx蛋白(hDaxx)在HeLa细胞内的亚细胞定位及诱导HeLa细胞凋亡的影响.方法 Western印迹法检测融合蛋白DsRed-HPV 16 E6和EGFP-hDaxx的表达.激光共聚焦显微镜观察HPV16 E6和hDaxx的亚细胞定位.将HeLa细胞分为对照组、TNF-α处理组、转染空载体组、转染HPV16 E6组、共转染HPV16 E6和hDaxx组.后4组均经TNF-α诱导.用流式细胞仪测定细胞凋亡率,分光光度法检测Caspase-8与Caspase-3的相对活性.结果 融合蛋白DsRed-HPV16E6和EGFP-hDaxx在细胞内表达并分布于胞质与胞核,出现共定位现象,且部分hDaxx从胞核转移至胞质.转染E6组凋亡率(21.4%±1.1%)低于转染空载体组(27.0%±0.9%,P< 0.01);与转染E6组相比较,共转染组凋亡率(32.5%±2.1%)显著升高(P<0.01).转染E6组Caspase-8和Caspase-3相对活性分别为0.057±0.003、0.054±0.006,均低于空载体组(0.092±0.012、0.093±0.005,均P<0.01);与转染E6组相比较,共转染组Caspase-8和Caspase-3相对活性(0.109±0.013、0.110±0.004)均显著升高(P值均< 0.01).结论 HPV16 E6使部分hDaxx从胞核转位至胞质,二者发生共定位.HPV16E6蛋白可抑制TNF-α诱导的HeLa细胞凋亡,bDaxx高表达可下调HPV16 E6蛋白这种作用.

关 键 词:人乳头瘤病毒16  乳状瘤病毒E6蛋白质类  细胞凋亡  HeLa细胞

Localization of human papillomavirus type 16 E6 protein and hDaxx in a human cervical carcinoma cell line HeLa and their effects on cell apoptosis
CHEN Su-fang , ZHU Cui-ming , TANG Shuang-yang , YUMin-jun , SU Sheng-mei , YANG Fan , WAN Yan-ping. Localization of human papillomavirus type 16 E6 protein and hDaxx in a human cervical carcinoma cell line HeLa and their effects on cell apoptosis[J]. Chinese Journal of Dermatology, 2012, 45(6)
Authors:CHEN Su-fang    ZHU Cui-ming    TANG Shuang-yang    YUMin-jun    SU Sheng-mei    YANG Fan    WAN Yan-ping
Abstract:
Keywords:Human papillomavirus 16  Papillomavirus E6 proteins  Apoptosis  HeLa cells
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