抗鼻咽癌单克隆抗体BAC5单链抗体原核表达载体的构建和表达 |
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作者姓名: | 吴涛 唐彩华 肖锡宾 梁昌盛 刘长征 |
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作者单位: | 1. 中山大学中山医学院实验核医学教研室,广东,广州,510080 2. 中山大学肿瘤防治中心实验研究部,广东,广州,510080 |
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基金项目: | 国家自然科学基金资助项目(300070231);广东省鼻咽癌诊治研究重点实验室基金资助项目(99B07703S);肿瘤学科建设专项基金资助项目(自编2002c-1-11) |
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摘 要: | [目的]构建抗鼻咽癌单克隆抗体BAC5单链抗体的原核表达载体并观察其表达,为开展抗鼻咽癌单链抗体的进一步研究奠定基础.[方法]应用RT-PCR技术,扩增出鼻咽癌单克隆抗体BAC5的轻链、重链可变区基因,通过一段编码肽的序列进行连接,构建BAC5单链抗体表达载体pET22b-scFv,导人BL21(DE3)表达菌,并进行诱导表达.SDS-PAGE凝胶电泳鉴定融合蛋白的表达.[结果]克隆基因序列符合小鼠轻、重链可变区基因特征;pET22b-scFv表达质粒拼接正确;表达产物以包涵体形式为主.[结论]成功构建了能表达BAC5单链抗体的原核表达载体.
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关 键 词: | 单链抗体 基因克隆 鼻咽癌 |
文章编号: | 1672-3554(2005)3S-0006-04 |
修稿时间: | 2004-11-17 |
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