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香蕉类胡萝卜素羟化酶基因MaLUT5克隆与分析
引用本文:陈莹,薛丙涛,李志英,荆永琳,张玄兵,李春燕,颜航,王小冰,徐立.香蕉类胡萝卜素羟化酶基因MaLUT5克隆与分析[J].分子植物育种,2023(8):2499-2507.
作者姓名:陈莹  薛丙涛  李志英  荆永琳  张玄兵  李春燕  颜航  王小冰  徐立
作者单位:1. 海南大学园艺学院;2. 中国热带农业科学院热带作物品种资源研究所,海南省热带作物资源遗传改良与创新重点实验室;3. 长江大学农学院
基金项目:国家重点研发计划项目(021YFC2600603);
摘    要:LUT5 (Lutein deficient 5)负责编码类胡萝卜素羟化酶CYP97A3,参与类胡萝卜素羟基化。为研究LUT5对香蕉果肉类胡萝卜素的调控,本试验以Pilose香蕉叶片为模板,根据NCBI预测的香蕉LUT5序列设计引物进行克隆,并对蛋白质结构进行分析。结果显示,克隆出的MaLUT5 CDS区全序列长为1 971 bp,编码656个氨基酸;MaLUT5蛋白为亲水性不稳定酸性蛋白,主要由α-螺旋和无规则卷曲构成,定位于叶绿体外膜。对Pilose香蕉各个组织进行RT-qPCR检测,结果显示MaLUT5基因具有很强的组织特异性,且在生殖器官的表达水平高于营养器官。此外,对转pBI121-Ma LUT5拟南芥进行GUS组织化学染色分析,结果显示MaLUT5能在拟南芥全株表达。经过完全黑暗处理后,LUT5在AAA基因型中的表达量显著提升,而在BBB基因型的表达量下降。在Pilose变黄的果实中瞬时超表达MaLUT5,MaLUT5表达量和总类胡萝卜素含量显著提高,编码ε-羟化酶CYP97C1的LUT1 (Lutein deficient 1)表达量变化不显著。综上,初步推断LUT5在A...

关 键 词:香蕉  LUT5  类胡萝卜素羟化酶  高类胡萝卜素  生物强化
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