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沙门氏菌草酰乙酸脱羧酶在大肠杆菌中的表达、纯化及其生化鉴定
引用本文:齐立辉,郑新艳,冉婷婷,徐朗莱,王伟武.沙门氏菌草酰乙酸脱羧酶在大肠杆菌中的表达、纯化及其生化鉴定[J].南京农业大学学报,2010,33(4).
作者姓名:齐立辉  郑新艳  冉婷婷  徐朗莱  王伟武
作者单位:南京农业大学生命科学学院/农业部农业环境微生物工程重点开放实验室,江苏,南京,210095
基金项目:国家自然科学基金大科学装置联合基金项目,国家基础科学人才培养基金项目 
摘    要:为深入了解沙门氏菌草酰乙酸脱羧酶的生化特性及功能,将该酶基因克隆到表达载体中,转入大肠杆菌中诱导表达,表达产物经monomeric avidin-Sepharose亲和层析分离纯化,获得了纯的沙门氏菌草酰乙酸脱羧酶.结果表明:纯化后的草酰乙酸脱羧酶经SDS-PAGE检测,呈现3条蛋白谱带,相对分子质量分别为65×103、46×103、8.8×103左右;该酶不耐高温,50 ℃温浴1 h后活力几乎完全丧失;其最适pH为6.0左右;1 mmol·L-1Zn2+、0.5 mmol·L-1草酸和20 mmol·L-1丙酮酸几乎完全抑制该酶的活力,10~20 mmol·L-1NaCl对该酶有明显激活作用,但200~500 mmol·L-1的NaCl对该酶却有明显抑制作用.

关 键 词:草酰乙酸脱羧酶  Na+泵  酶纯化  生化特性

Purification and characterization of oxaloacetate decarboxylase from Salmonella typhimurium heterologous expressed in Escherichia coli
QI Li-hui,ZHENG Xin-yan,RAN Ting-ting,XU Lang-lai,WANG Wei-wu.Purification and characterization of oxaloacetate decarboxylase from Salmonella typhimurium heterologous expressed in Escherichia coli[J].Journal of Nanjing Agricultural University,2010,33(4).
Authors:QI Li-hui  ZHENG Xin-yan  RAN Ting-ting  XU Lang-lai  WANG Wei-wu
Abstract:
Keywords:
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