| 利用小鼠胚胎干细胞贴壁制备拟胚体的新方法研究 |
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| 引用本文： | 韩雅玲,田孝祥,康建,徐凯,闫承慧.利用小鼠胚胎干细胞贴壁制备拟胚体的新方法研究[J].中国实用内科杂志,2006,26(21):1715-1717. |
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| 作者姓名： | 韩雅玲 田孝祥 康建 徐凯 闫承慧 |
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| 作者单位： | 沈阳军区总医院全军心血管病研究所心内科,辽宁,沈阳,110016 |
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| 摘 要： | 目的为改进拟胚体制备过程中分化不同步等问题,探讨建立小鼠胚胎干细胞贴壁制备拟胚体的新方法。方法沈阳军区总医院心内科于2004年10月至2006年1月对小鼠进行研究,当小鼠胚胎干细胞R1生长至70%～80%亚融合时,将其消化成单细胞,以1×106的细胞数接种到直径100mm组织培养皿中,用含低浓度白血病抑制因子(LIF)1μg/L的胚胎干细胞培养液连续贴壁培养3d后,收集贴壁细胞团继续悬浮培养。对悬浮培养的拟胚体及其冰冻切片行形态学观察,对悬浮及贴壁分化的拟胚体行甲胎蛋白(AFP)、血小板内皮细胞粘附分子-1(PECAM-1)及神经丝蛋白68KD(NF-68)免疫荧光染色。结果形态学观察用本法得到的拟胚体大小均一,分化同步,能展示从简单拟胚体到成熟囊性拟胚体的典型发育过程。免疫荧光染色显示,AFP、PECAM-1及NF-68三种标志物表达均为阳性。结论与传统方法相比,该法操作简便、拟胚体形成率高、分化阶段同步,具有分化为3个胚层来源细胞的能力,可作为胚胎早期发育和胚胎干细胞分化等研究的理想工具。
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| 关 键 词： | 胚胎干细胞 拟胚体 形态 分化 |
| 文章编号： | 1005-2194(2006)21-1715-03 |
| 修稿时间： | 2006年8月28日 |
A novel method for preparing embryoid bodies with attached embryonic stem cells |
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| Han Yaling,Tian Xiaoxiang,Kang Jian,et al..A novel method for preparing embryoid bodies with attached embryonic stem cells[J].Chinese Journal of Practical Internal Medicine,2006,26(21):1715-1717. |
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| Authors: | Han Yaling Tian Xiaoxiang Kang Jian |
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| Affiliation: | Han Yaling,Tian Xiaoxiang,Kang Jian,et al.Department of Cardiology,Shenyang General Hospital,Cardiovascular Research Institute of PLA,Shenyang 110016,China |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Embryonic stem cell Embryoid body Morphology Differentiation |
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