不育相关泛素特异性蛋白酶USP26的分子克隆及活性分析 |
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引用本文: | 杜霈,赵晶晶,秘迎君,赵静,韩薇,闫静,刘殿武,田庆宝.不育相关泛素特异性蛋白酶USP26的分子克隆及活性分析[J].疾病控制杂志,2015,19(6). |
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作者姓名: | 杜霈 赵晶晶 秘迎君 赵静 韩薇 闫静 刘殿武 田庆宝 |
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作者单位: | 1. 河北医科大学公共卫生学院流行病与卫生统计学教研室,河北石家庄,050017 2. 河北医科大学电子显微镜研究中心,河北石家庄,050017 |
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摘 要: | 目的 对克隆泛素特异性蛋白酶26(ubiquitin-specific protease 26,usp26)基因进行表达和活性测定.方法 采用聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR),从小鼠全血中扩增获得usp26基因并测定序列.将基因片段与pGEX-6p-1拼接,应用异丙基-β-d-硫代半乳糖苷(isopropyl-β-d-thiogalactoside,IPTG)使蛋白表达并利用Ub-Met-β-gal鉴定活性.用多重比对方法分析人类、小鼠及褐家鼠usp26基因编码氨基酸序列的差异.结果 本实验克隆出usp26基因.构建出pGEX-usp26质粒,该质粒表达出GST-USP26结合蛋白并测得其活性.三个种属含有相同的赖氨酸结构域(Cys box)与组氨酸结构域(His box)特征部位氨基酸.结论 usp26基因克隆并表达成功,完成活性测定,为进一步探索usp26在男性不育机制方面的作用提供了一种活性研究方法.
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关 键 词: | 泛素化 克隆 分子 不孕 男(雄)性 |
Molecular cloning and activity analysis of infertility-associated gene ubiquitin-specific protease 26 |
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Abstract: | |
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Keywords: | Ubiquitination Cloning molecular Infertility male |
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