| 仔猪血清大豆抗原蛋白抗体间接ELISA检测方法的建立 |
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| 引用本文： | 寇亚楠,马良友,罗 莹,等. 仔猪血清大豆抗原蛋白抗体间接ELISA检测方法的建立[J]. 西北农林科技大学学报(自然科学版), 2014, 42(3): 17-22 |
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| 作者姓名： | 寇亚楠 马良友 罗 莹 等 |
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| 作者单位： | 安徽农业大学 动物科技学院;安徽农业大学 动物科技学院;安徽农业大学 动物科技学院 |
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| 基金项目： | 科技部科技富民强县专项行动计划项目（国科发农【2012】745号） |
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| 摘 要： | 【目的】研究并建立大豆抗原蛋白血清抗体间接ELISA检测方法。【方法】首先用大豆抗原蛋白对仔猪进行致敏,然后采用棋盘滴定法确定最佳抗原包被质量浓度及血清稀释倍数,并对其他条件进行优化,最终建立检测血清大豆抗原蛋白11S、7S抗体的间接ELISA方法,确立待测血清判定标准,并对建立的ELISA方法进行重复性、准确性和敏感性检测。【结果】建立的ELISA方法的最佳反应条件为:11S抗原蛋白最适包被质量浓度为2.0μg/mL,包被作用时间37℃下2h;将10g/L BSA作为封闭液,37℃封闭1h;待测血清37℃作用1h;酶标二抗最适稀释度为1∶1 500,37℃作用1h;显色剂最佳显色时间15min。7S抗原蛋白的最适包被质量浓度为2.5μg/mL,包被作用时间37℃下2h;将10g/L BSA作为封闭液,37℃封闭1h;待测血清37℃作用1h;酶标二抗最适稀释度为1∶1 500,37℃作用1h;显色剂最佳显色时间25min。11S和7S抗原蛋白间接ELISA检测方法的批内、批间变异系数均小于10%,重复性较好,灵敏度较高。【结论】建立了仔猪血清大豆抗原蛋白抗体间接ELISA检测方法,该法具有很强的特异性和敏感性,可用于大豆抗原蛋白11S、7S过敏反应的临床诊断。
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| 关 键 词： | 大豆抗原蛋白；仔猪；血清抗体；间接ELISA |
| 收稿时间： | 2013-03-21 |
Establishment of an indirect enzyme-linked immune sorbent assay for detection of serum antibody of soybean antigen protein in piglets |
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| KOU Ya-nan,MA Liang-you and LUO Ying,et al. Establishment of an indirect enzyme-linked immune sorbent assay for detection of serum antibody of soybean antigen protein in piglets[J]. Journal of Northwest A&F University（Natural Science Edition）, 2014, 42(3): 17-22 |
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| Authors: | KOU Ya-nan MA Liang-you LUO Ying et al |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | soybean antigen protein piglets serum antibody indirect ELISA |
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