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口蹄疫病毒非结构蛋白基因3ABC在大肠杆菌中的高效表达
引用本文:曹轶梅,刘在新,卢曾军,郭建宏,常惠芸,谢庆阁. 口蹄疫病毒非结构蛋白基因3ABC在大肠杆菌中的高效表达[J]. 畜牧兽医学报, 2004, 35(1): 115-118
作者姓名:曹轶梅  刘在新  卢曾军  郭建宏  常惠芸  谢庆阁
作者单位:中国农业科学院兰州兽医研究所农业部病毒学重点实验室,甘肃,兰州,730046
基金项目:国家973课题(G19990119011),甘肃省科技攻关项目(GS993-A41-025),中国农业科学院院长基金(0028-16),社会公益基金,"十五"国家科技攻关(2002BA514A-18-1)。
摘    要:将牛源O型口蹄疫病毒(Foot-and-mouth disease virus,FMDV)China/99株非结构蛋白基因3ABC从pGEM-T-3ABC重组质粒中亚克隆到原核表达载体pTriEx-4Neo上,成功构建重组表达质粒pTriEx-3ABC。将其转化大肠杆菌Rosetta(DE3)感受态细胞中表达,表达产物经SDS-PAGE可检测到分子量约为59.1ku的目的蛋白带,经薄层扫描分析,目的蛋白占菌体总蛋白的31.4%。Western blotting分析证明表达产物能被FMDv阳性血清所识别。表达产物纯化后作抗原进行ELISA检测,结果表明,表达的蛋白显示特异的免疫学活性,并能区分自然感染动物和注苗动物。研究为以FMDV非结构蛋白为抗原,建立自然感染动物和注苗动物的鉴别诊断方法提供了材料。

关 键 词:口蹄疫 病毒 非结构蛋白基因 3ABC 大肠杆菌 基因表达
文章编号:0366-6964(2004)01-0115-04

Experession of Nonstructural Protein Gene 3ABC of Foot-and-Mouth Disease Virus in E.coli
CAO Yi-mei,LIU Zai-xing,LU Zeng-jun,GUO Jian-hong,CANG Hui-yun,XIE Qing-ge. Experession of Nonstructural Protein Gene 3ABC of Foot-and-Mouth Disease Virus in E.coli[J]. Chinese Journal of Animal and Veterinary Sciences, 2004, 35(1): 115-118
Authors:CAO Yi-mei  LIU Zai-xing  LU Zeng-jun  GUO Jian-hong  CANG Hui-yun  XIE Qing-ge
Abstract:Foot-and-mouth disease virus(FMDV) nonstructural protein gene 3ABC was expressed in E.coli.59.1 Ku fusion protein could be tested by SDS-PAGE and can be recognized by the positive bovine serum of FMDV.Through gel thin layer scanning analysis,the amount of target protein is over 31.4% of the total bacteria protein.The expressed product was used as the antigen in an enzyme-linked immunosorbent assay,this assay allowed the differentiation of vaccinated from infected bovine.
Keywords:FMDV  3ABC gene  Expression.
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