| 小鼠胚胎神经干细胞的体外生长特性和相关基因的表达 |
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| 引用本文： | 山爱景,郭国庆,孙艳,沈伟哉. 小鼠胚胎神经干细胞的体外生长特性和相关基因的表达[J]. 中国组织工程研究与临床康复, 2006, 10(5): 19-21 |
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| 作者姓名： | 山爱景 郭国庆 孙艳 沈伟哉 |
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| 作者单位： | 1. 暨南大学,医学院解剖教研室,广东省,广州市,510630
2. 暨南大学,血液病研究所,广东省,广州市,510630 |
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| 基金项目： | 广东省自然科学基金团队项目(039213)，广州市科技计划项目(2004J1-C0241)，广东省中医药管理局项目(401040)资助~~ |
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| 摘 要： | 目的:观察小鼠胚胎神经干细胞的体外生长特性并检测其相关基因的表达。方法:实验于2005-02/06在暨南大学医学院中心实验室进行。①取妊娠13.5d昆明小鼠分离胚胎大脑中的神经干细胞,用添加碱性成纤维细胞生长因子的无血清培养基进行体外培养,取培养3d的神经球接种于多聚赖氨酸包被的培养瓶,用含血清的培养基诱导分化。②免疫细胞化学检测细胞表面抗原。③四甲基偶氮唑盐法绘制生长曲线。④流式细胞术检测细胞周期。⑤反转录-聚合酶链反应和免疫细胞化学技术对神经干细胞进行鉴定。结果:①胚胎神经干细胞及其分化细胞的抗原表达:血清诱导8h,分化细胞中(8.9±5.6)%细胞呈Tubulin阳性,(87.5±7.4)%细胞胞浆呈胶质纤维酸性蛋白阳性表达。未诱导细胞近100%呈巢蛋白阳性,仅有极少数细胞Tubulin阳性或胶质纤维酸性蛋白阳性。②胚胎神经干细胞的细胞周期:从小鼠胚胎大脑获取的神经干细胞3d左右进入指数生长期;原代培养细胞83.8%处于静止期/DNA合成前期。③原代与传代细胞均表达巢蛋白mRNA,聚集形成的神经球巢蛋白阳性。血清诱导4h胚胎神经干细胞开始转录神经元相关基因Tau和胶质细胞相关基因胶质纤维酸性蛋白。结论:从小鼠胚胎大脑可成功分离获得大量胚胎神经干细胞,并在含碱性成纤维细胞生长因子的条件培养基中迅速增殖,血清诱导下分化生成神经元和星型胶质细胞。
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| 关 键 词： | 干细胞/细胞学 细胞分化 脑/胚胎学 细胞 培养的 流式细胞术 逆转录聚合酶链反应 |
| 文章编号： | 1671-5926(2006)05-0019-03 |
| 修稿时间： | 2005-11-15 |
In vitro growth characteristics and related gene expression of neural stem cells from embryo of mouse |
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| Shan Ai-jing,Guo Guo-qing,Sun Yan,Shen Wei-zai. In vitro growth characteristics and related gene expression of neural stem cells from embryo of mouse[J]. Journal of Clinical Rehabilitative Tissue Engineering Research, 2006, 10(5): 19-21 |
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| Authors: | Shan Ai-jing Guo Guo-qing Sun Yan Shen Wei-zai |
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