产α-葡萄糖苷酶抑制剂罗汉果内生菌株的筛选鉴定及发酵条件优化

采用对硝基苯基-α-D-吡喃葡萄糖苷（PNPG）法，从罗汉果内生菌中筛选高产α-葡萄糖苷酶抑制剂（α-GI）的菌株，对该菌株进行形态观察和分子生物学鉴定。以α-葡萄糖苷酶抑制率为评价指标，利用单因素试验及正交试验进行发酵条件优化，进一步用有机溶剂萃取发酵液后进行活性部位追踪。结果表明，从罗汉果内生菌中筛选出一株高产α-GI的菌株，编号为PD-14，被鉴定为贝莱斯芽孢杆菌（Bacillus velezensis），该菌株产α-GI的最佳发酵条件为初始pH值7，装液量100 mL/250 mL，发酵时间4 d，发酵温度30 ℃，接种量7%。此优化条件下，菌株PD-14发酵原液对α-葡萄糖苷酶的抑制率达到91.05%，是优化前的1.5倍。α-GI为胞外产物，萃取后筛选到活性部位为正丁醇相和水相，α-葡萄糖苷酶抑制率分别为77.61%和76.70%。