| 实时荧光定量PCR检测沙门菌flor基因和sul2基因方法的建立 |
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| 引用本文： | 曹堃,王元兰,刘宗梁,刘军军,魏建忠,孙裴,李郁.实时荧光定量PCR检测沙门菌flor基因和sul2基因方法的建立[J].中国抗生素杂志,2015,40(7). |
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| 作者姓名： | 曹堃 王元兰 刘宗梁 刘军军 魏建忠 孙裴 李郁 |
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| 作者单位： | 安徽农业大学动物科技学院,安徽省畜禽产业共性研究院,合肥230036 |
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| 基金项目： | 安徽农业大学学科学位点建设项目，安徽农业大学大学生创新基金项目 |
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| 摘 要： | 目的 建立一种flor基因和sul2基因的SYBR Green Ⅰ实时荧光定量PCR方法,为检测沙门菌的耐药性以及耐药基因分子流行病学调查奠定基础.方法 以氟苯尼考、复方磺胺甲噁唑抗性的沙门菌菌株为材料,根据GenBank中登陆的沙门菌flor和sul2基因序列,设计并合成引物,建立基于SYBR Green Ⅰ染料技术的Real-Time PCR检测体系,绘制出标准曲线并对其溶解曲线进行分析.结果 以pMD 18-T为载体构建的标准品的Ct值与样品的浓度的对数在一定范围内呈现良好的线性关系,两基因的检测域值较小,flor基因可以检测到102 copies/μL的样品,sul2基因可以检测到103 copies/μL的样品,经耐药性与基因表达量相关分析,耐药性较高的菌株其flor基因、sul2基因表达量也较高.结论 建立的检测沙门菌中flor因和sul2基因的荧光定量PCR方法具有很好的灵敏性、特异性和重复性,可以广泛用于临床中lor和sul2两种基因的检测以及沙门菌耐药分子流行病学的调查.
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| 关 键 词： | 沙门菌 实时荧光定量PCR flor基因 sul2基因 |
Establish the detecting mothed of Salmonella flor and sul2 genes by Real-Time quantitative PCR |
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| Cao Kun,Wang Yuan-lan,Liu Zong-liang,Liu Jun-jun,Wei Jian-zhong,Sun Pei,Li Yu.Establish the detecting mothed of Salmonella flor and sul2 genes by Real-Time quantitative PCR[J].Chinese Journal of Antibiotics,2015,40(7). |
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| Authors: | Cao Kun Wang Yuan-lan Liu Zong-liang Liu Jun-jun Wei Jian-zhong Sun Pei Li Yu |
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| Keywords: | Salmonella Real-time quantitive PCR flor gene sul2 gene |
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